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| Cátedra Villarreal Posgrado | Lima, Perú | V. 3 | N. 1 | enero - junio | 2024 |
Ecacia antibacteriana del aceite de Thymus vulgaris
(tomillo) contra Porphyromonas gingivalis
y Prevotella intermedia: In vitro
Antibacterial ecacy of Thymus vulgaris (thyme) oil against
Porphyromonas gingivalis and Prevotella intermedia: In vitro
Román Mendoza Lupuche
1
Lucía Marisela Quispe Tasayco
2
Lucy del Pilar Chiong Lam
3
Segundo Charles Huamán Bautista
4
Gilmer Neker Solis Condor
5
Alfredo Tecse Ccorihuaman
6
Daniel Augusto Alvitez Temoche
7
Abstract
The aim was to evaluate in vitro the antibacterial eect of Thymus vulgaris
(Thyme) oil at 100%, 75% and 50% and a control group of Cetylpyridinium
Chloride at 0.05%, on strains of Porphyromonas gingivalis and Prevotella
intermedia at 24 hours, 48 and 72 hours. 10 plates were sampled for each bacterial
strain of Porphyromonas gingivalis (ATCC33277) and Prevotella intermedia
(ATCC25611). The culture medium used was blood agar. The technique used
was Kirby Bauer, the inhibition zones of four discs that were placed in each
petri dish were measured, with the concentrations of the essential oil of Thymus
vulgaris at 50, 75 and 100%, as well as Cetylpyridinium Chloride at 0.05%.
at 24, 48 and 72 hours after the respective cultures were done. At 24 hours
the antimicrobial activity on Porphyromonas gingivalis of Cetylpyridinium
Chloride at 0.05% was 10.7 ± 0.27 mm, while with the essential oil of Thymus
vulgaris at concentrations of 100% it was 28.56 ± 0.61 mm, at 75% it was
21.76 ± 1.04 mm, while at 50% it was 14.22 ± 0.76. Signicant dierences
were found between the antimicrobial activity of Thymus vulgaris essential oil
at 100%, 75%, 50% and Cetylpyridinium Chloride at 0.05% against strains of
Porphyromonas gingivalis and Prevotella intermedia. It is recommended to
carry out clinical application research with the use of Thymus vulgaris essential
oil.
Keywords: Thymus vulgaris, porphyromonas gingivalis, prevotella intermedia,
cetylpyridinium chloride.
Resumen
El objetivo fue evaluar in vitro el efecto antibacteriano del aceite de Thymus
vulgaris (Tomillo) al 100%, 75% y 50% y de un grupo control de Cloruro
de Cetilpiridinio al 0.05%, sobre cepas de Porphyromonas gingivalis y
Prevotella intermedia a las 24, 48 y 72 horas. Se muestrearon 10 placas por
cada cepa bacterian a de Porphyromonas gingivalis (ATCC33277) y Prevotella
intermedia (ATCC25611). El medio de cultivo utilizado fue Agar sangre. La
técnica empleada fue Kirby Bauer, se midieron los halos de inhibición de cuatro
discos que fueron colocados en cada placa petri, con las concentraciones del
aceite esencial de Thymus vulgaris al 50, 75 y 100 %, así como del Cloruro de
Cetilpiridinio al 0.05% a las 24, 48 y 72 horas luego de que se hiciera los cultivos
respectivos. A las 24 horas la actividad antimicrobiana sobre Porphyromonas
gingivalis del Cloruro de Cetilpiridinio al 0.05% fue de 10.7 ± 0.27 mm,
mientras que con el aceite esencial de Thymus vulgaris a concentraciones de
100% fue de 28.56 ± 0.61 mm, al 75% fue de 21.76 ± 1.04 mm, mientras que
al 50% fue de 14.22 ± 0.76 . Se encontraron diferencias signicativas entre la
actividad antimicrobiana del aceite esencial de Thymus vulgaris al 100%, 75%,
50% y Cloruro de Cetilpiridinio al 0.05% frente a cepas de Porphyromonas
gingivalis y Prevotella intermedia. Se recomienda realizar investigaciones de
aplicación clínica con el uso aceite esencial de Thymus vulgaris.
Palabras Clave: Thymus vulgaris, porphyromonas gingivalis, prevotella
intermedia, cloruro de cetilpiridinio.
Recibido: 18 de junio de 2024 | Revisado: 01 de agosto de 2024 | Aceptado: 06 de septiembre de 2024
1,2,3,4,6,7 Universidad Nacional Federico Villarreal – UNFV.
Lima, Perú
5 Universidad Nacional Daniel Alcides Carrión - UNDAC.
https://orcid.org/0000-0003-2089-8965
Correo: rmendoza@unfv.edu.pe
https://orcid.org/0000-0002-0594-5834
Correo: lquispe@unfv.edu.pe
https://orcid.org/0000-0002-5847-0692
Correo: lchiong@unfv.edu.pe
Correo: 2012013521@unfv.edu.pe
https://orcid.org/0000-0002-7749-4817
Correo: gsolisc@undac.edu.pe
https://orcid.org/0000-0002-8967-1139
Correo: atecse@unfv.edu.pe
https://orcid.org/0000-0002-3337-4098
Correo: dalvitezt@unfv.edu.pe
https://doi.org/10.62428/rcvp2024311836
Este artículo es de acceso abierto distribuido
bajo los terminos y condiciones de la licencia
Creative Commons Attribution-
NonCommercial- ShareAlike 4.0 International
ISSN 2955-8476 | e-ISSN 2955-8174
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Introducción
La evidencia reciente referente a las
enfermedades de la cavidad bucal sugiere que
aproximadamente en el mundo, 538 millones de personas
padecen enfermedad periodontal grave y 276 millones
de las cuales perdieron sus dientes. Se espera que las
cifras aumenten a medida que la población envejezca
(Kassebaum et al., 2017). Además de ser el principal
factor causante de la pérdida de dientes, la periodontitis
está asociada con varias enfermedades sistémicas como
aterosclerosis, diabetes, artritis reumatoide y resultados
adversos del embarazo como bajo peso al nacer (Kinane,
Stathopoulou y Papapanou, 2017).
La periodontitis es una enfermedad infecciosa
polimicrobiana crónica y lentamente progresiva que
afecta a todo lo que rodea el diente y en especial
a los tejidos de soporte. Con la presencia de esta
infección, el surco gingival se agranda y se convierte
en una “bolsa” con inamación e infección local. La
enfermedad periodontal se caracteriza por la destrucción
de los ligamentos periodontales, el hueso alveolar y
la formación de bolsas gingivales, lo que conduce
a la pérdida de dientes. Se sabe que esta infección es
causada por microorganismos como: Aggregatibacter
actinomycetemcomitans, Prevotella intermedia y
Porphyromonas gingivales.
La planta de Thymus vulgaris (tomillo), es
un arbusto espeso, de base leñosa, de 10 a 40 cm de
altura con pequeñas hojas ovaladas de color verde
grisáceo muy aromáticas que contienen numerosas
glándulas pequeñas con racimos de ores de color rosa
o púrpura (Papapanou et al., 2018; Hajishengallis y
Lamont, 2021). El género Thymus vulgaris comprende
aproximadamente 400 especies, varias de las cuales
son ampliamente utilizadas en la medicina tradicional
(Sharaf y Hijazi, 2022; Ghorab, Kabouche y Kabouche,
2014).
La actividad antimicrobiana in vitro del aceite
esencial de hojas de Thymus vulgaris sobre algunos
patógenos humanos está ampliamente documentada, los
efectos de este aceite sobre patógenos orales como son
los microorganismos periodontopáticos y cariogénicos
no se comprenden completamente ya que faltan
estudiar e investigar el comportamiento de muchos
microorganismos presentes en la cavidad bucal. En el
presente estudio, se demuestra la actividad inhibidora
o antibacteriana in vitro del aceite de Thymus vulgaris
en patógenos orales, para ello se ha seleccionado a la
Prevotella intermedia y a Porphyromonas gingivalis.
Estas bacterias cumplen un papel muy importante
desde el inicio y posterior desarrollo de la periodontitis,
participan muy activamente en la formación de la
bolsa periodontal, destrucción del tejido conectivo y
reabsorción del hueso alveolar a través de un mecanismo
inmuno patogénico (Galovičová et al., 2021; Amaya et
al., 2021). Ante la evidencia de que las enfermedades
bucales se incrementan y muchos son de origen
bacteriano, se está investigando alternativas de forma
natural para controlar dichas bacterias, es así, como
a la toterapia se le está dando mucha importancia
en investigaciones, como son los aceites esenciales,
que son mezclas de sustancias obtenidas mediante un
proceso de destilación química de plantas naturales, es
el caso del Thymus vulgaris, conocido como el tomillo,
usado mayormente en preparación de alimentos (Fani y
Kohanteb, 2017). Los aceites esenciales en su mayoría
son biodegradables, amigables con el ambiente y poseen
bajos o inexistentes niveles de toxicidad. Además,
presentan características antioxidantes, antibacteriano,
antifúngico y antiviral (Rueda et al., 2018).
Muchos estudios e investigaciones evidencian
la ecacia bactericida de las plantas, el propósito del
estudio es demostrar in vitro la ecacia antibacteriana del
aceite esencial Thymus vulgaris conocido como tomillo
en cepas de Porphyromonas gingivalis y Prevotella
intermedia mediante el método experimental.
Galovičová et al. (2021) examinaron la
actividad biológica del aceite esencial de Thymus
vulgaris. Los principales componentes del aceite
esencial de Thymus vulgaris fueron timol (48,1 %), p -
cimeno (11,7 %), 1,8 - cineol (6,7 %), γ - terpineno (6,1
%) y carvacrol (5,5 %). La actividad antioxidante fue de
85,2 ± 0,2%, lo que corresponde a 479,34 ± 1,1 TEAC.
La acción antimicrobiana fue moderada o muy fuerte
con zonas de inhibición de 9,89 a 22,44 mm. Los valores
más bajos de concentración mínima de inhibición se
determinaron frente a Bacillus subtilis, Enterococcus
faecalis y Staphylococcus aureus. El análisis antifúngico
in situ en el pan muestra que la fase de vapor del
aceite esencial de Thymus vulgaris puede detener el
crecimiento de los hongos lamentosos microscópicos
del género Penicillium. La acción antimicrobiana contra
Sierrata marcescens mostró una inhibición del 46,78-
87,80% a concentraciones de 62,5-500 ml. Los análisis
MALDI TOF MS sugieren modicaciones en el perl
de proteínas de las bacterias formadoras de biopelículas
Pseudomonas uorescens y Salmonella enteritidis
después del quinto y noveno día, respectivamente.
Amaya et al. (2021) en Colombia señalan que los
aceites esenciales, son compuestos orgánicos vegetales
que tienen principios volátiles en donde generalmente
son modicados cuando ocurre su proceso de
extracción, su composición química de fenoles, terpenos
y monoterpenos les conere capacidades antioxidantes
y antimicrobianas. Según estudios in vitro, los aceites
esenciales obtenidos de las plantas Thymus vulgaris
(tomillo) y Origanum vulgare subsp. hirtum(orégano
griego) podrían llegar a ser una alternativa de manejo y
erradicación de la enfermedad de marchitez bacteriana,
ya que demostraron un mejor efecto inhibitorio que los
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antibióticos tradicionalmente utilizados en el control
de plagas como la Estreptomicina y Ampicilina, sin
embargo, sugieren estudios de totoxicidad para evaluar
si estas concentraciones afectan o no el desarrollo
adecuado de la planta. La información representa una
alternativa sostenible con el medio ambiente a través de
los Aceites Esenciales (AE) para así disminuir el impacto
de toquímicos evidenciando el biocontrol de la bacteria.
Adicionalmente se propone el uso de los AE como ayuda
para el manejo y erradicación de la marchitez bacteriana
causada por Ralstonia solanacearum.
Mendoza et al. (2023) un trabajo realizado
en Perú, se comprobó que algunas plantas conocidas
como medicinales tienen propiedades antibacterianas,
antiinamatorias, antifúngicas es por ello que se
investiga a la Matricaria recutita conocida como
manzanilla, según estudios e investigaciones han
demostrado que tiene componentes antibacterianos , el
objetivo de esta investigación fue comprobar su ecacia
antibacteriana del aceite esencial a concentración de 50
y 75 % y utilizando cepas de Porphyromonas gingivalis
(ATCC33277) y Prevotella intermedia (ATCC25611),
para posteriormente medir la sensibilidad mediante los
halos en diferentes tiempos que fue a las 24 y 48 horas,
para la medición se utilizó el instrumento vernier digital.
El procedimiento fue colocar discos embebidos con
las sustancias en placas Petri, se utilizó como control
positivo agua destilada, así como también la clorhexidina
al 0.12%, y en los tiempos antes mencionados se hizo la
lectura correspondiente, en las cepas de Porphyromonas
gingivalis (ATCC33277) con las mediciones a las 24
horas fue de 2,.14 ± 2,61 mm. a las 48 horas fue de
22.63 ± 2,67 mm. para la clorhexidina al 0.12%; las
mediciones del aceite esencial al 75% a las 24 y 48
horas. Fue de 18,90 ± 0.41 y 19,22 ± 0,54 , mientras que
las mediciones de los halos al 50% a los mismos tiempos
fue de 15,55 ± 0,45 y 15,77 ± 0,46. Se evidencia que
estadísticamente no hay signicancia entre los grupos
analizados, la importancia de la investigación radica en
que la Matricaria recutita es una planta con propiedades
bactericidas y que afectan la bacterias como es la
Porphyromonas gingivalis y Prevotella intermedia, así
como los diferentes microorganismos patógenos y no
patógenos presentes en la cavidad bucal del ser humano.
Por otro lado, Miranda et al. (2020) en Brasil
realizaron un estudio con el objetivo de evaluar las
propiedades antimicrobianas de CPC al 0,075% en un
modelo de biopelícula subgingival multiespecies In
vitro. El biolm subgingival compuesto por 31 especies
relacionadas con la periodontitis se formó durante 7
días, empleando el dispositivo de Calgary. El manejo
con CPC y clorhexidina (CHX) 0,12% (como control
positivo) se realizaron 2x/día, durante 1 min, desde el
día 3 hasta el nal del período experimental, totalizando
8 tratamientos. Después de 7 días de formación del
biolm, se evaluó la actividad metabólica del biolm
mediante una reacción colorimétrica y la composición
microbiana del biolm mediante hibridación ADN-ADN.
El análisis estadístico se realizó empleando ANOVA con
datos transformados a través de BOX-COX seguido de
Dunnett post-hoc. Dando como resultado tanto CPC
como CHX disminuyeron la actividad metabólica del
biolm en un 60% y bajaron estadísticamente los niveles
de Streptococcus oralis, Streptococcus intermedius,
Streptococcus gordonii, Veillonella párvula, Actinomyces
naeslundii, Actinomyces gerencseriae, Capnocytophaga
gingivalis, Eikenella corrodens, Parvimonas micra,
Streptococcus constelatus, Eubacterium. saburreum,
Propionibacterium acnes y Gemella morbillorum
(p≤0.05) en comparación con las biopelículas tratadas
con vehículo. Actinomyces odontolyticus y Actinomyces
israelli solo fueron afectadas por CPC (p≤ 05) mientras
que Porphyromona gingivalis y Fusobaterium nucleatum
vicentii solo fueron inhibidas por CHX (p≤0.05).
Neyra (2019) en Perú realizó un trabajo de
investigación In vitro, teniendo el objetivo de comparar
la actividad antibacteriana de los aceites esenciales
Schinus molle L. (molle) y Thymus vulgaris (tomillo)
con el gluconato de clorhexidina al 0.12% frente a
Porphyromona gingivalis. Esta investigación fue de tipo
experimental y se realizó en la Universidad Nacional
Mayor de San Marcos en su Laboratorio de microbiología
de la Facultad de Odontología. La población estuvo
conformada por 40 placas petri donde se usó los aceites
esenciales Thymus vulgaris al 100% y 50 %, Schinus
molle L. al 100% y 50%, lo cual se comparó con el
gluconato de clorhexidina al 0.12% y teniendo como
control negativo el DMSO (dimetilsulfoxido), donde se
empleó el método de difusión con discos y se incubaron
por 15 días a 37º C, los halos de inhibición son retirados
por única vez en el momento de la medición. El análisis
de datos se procesó con la prueba estadística Pos Hoc
de Scheer, obteniéndose como resultado entre los dos
aceites, el que tuvo mayor efecto sobre Porphyromonas
gingivalis fue el tomillo y en menor efecto el molle.
Los aceites esenciales del tomillo y molle tienen
mayor actividad antibacteriana que el gluconato de
clorhexidina al 0.12%. en el trabajo de Fani et al.
(2017) en Irán ejecutaron un trabajo de investigación
de tipo experimental titulado, Actividad antimicrobiana
in vitro del aceite esencial de Thymus vulgaris contra
los principales patógenos orales. El objetivo de la
investigación fue estudiar la actividad antimicrobiana
del aceite de Thymus vulgaris sobre algunos patógenos
orales. El aceite de Thymus vulgaris se elaboró por
hidrodestilación y se probó frente a 30 aislados clínicos
de cada uno de Streptococcus pyogenes, Streptococcus
mutans, Candida albicans, Porphyromonas gingivalis
y Aggregatibacter actinomycetemcomitans, elaborados
a partir de infecciones orales relacionadas utilizando
métodos de difusión en disco de agar y microdilución
en caldo. Obteniendo como resultado que el aceite en
concentraciones de 16 a 256 μg/mL presentó una fuerte
actividad inhibidora en todos los cultivos bacterianos
que produjeron zonas de inhibición de 7,5 a 42 mm
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según lo medido por el método de difusión en disco
de agar. Streptococcus pyogenes y Streptococcus
mutans fueron los aislamientos más sensibles con
concentraciones inhibitorias mínimas de 1,9 y 3,6 μg/ml,
respectivamente. Los valores mínimos de concentración
inhibitoria para Candida albicans, Aggregatibacter
actinomycetemcomitans y P gingivalis fueron 16.3, 32 y
32 μg/m L, respectivamente.
Loyola et al. (2020) reportaron los benecios
de las vegetales y muchos de ellos aparte de servir para
la alimentación del hombre, estas también son utilizadas
en la medicina, actualmente existe la especialidad de
Medicina alternativa y complementaria, que se encarga
del estudio e investigaciones de medios alternativos a
los fármacos para tratamientos especícos, es por ello
que se decide realizar un estudio mediante el extracto
etanólico de Erythroxylum coca lam y el Schinus molle
en concentraciones al 50% y 75% comparando su
efectividad antibacteriana en la bacteria de Streptococcus
mutans (ATCC 27175), este trabajo experimental se
realizó en los laboratorios de la Universidad de San
Marcos, Lima, Perú para dicho procedimiento del extracto
etanólico se hizo por el método de ltración al vació en
concentraciones de 50% y 75%, se utilizó como control
positivo a la clorhexidina al 0,12%, esto se comprobó
la ecacia antibacteriana sobre Streptococcus mutans, el
medio de cultivo fue agar Mitis salivariu, medio ideal
para el crecimiento de bacterias. Es importante evaluar
el potencial antibacteriano del aceite esencial del Tymus
vulgaris contra bacterias patógenas, por ello el objetivo
de la investigación fue evaluar el efecto antibacteriano
del aceite de Thymus vulgaris (Tomillo) sobre cepas de
Porphyromonas gingivalis y Prevotella intermedia, In
vitro.
Método
Diseño de estudio, experimental, In vitro
y analítico. Fue realizado en el año 2023, en los
Laboratorios de Bioquímica y Microbiología de la
Facultad de Odontología de la Universidad Nacional
Federico Villarreal.
Muestra y criterios de selección, la muestra
fue colocada en 100 discos de papel Whatman (Merck
KgaA; Darmstadt, Alemania) y se dividieron en 10
grupos para lo que se utilizó el programa STATA 15®
(College Station, Texas 77845 USA) con un Alpha de
0.05 y un Beta de 0.8. Los discos de papel Whatman
fueron embebidos con aceite esencial de Thymus
vulgaris (AETV) a concentraciones de al 100%, 75% y
50%, cloruro de cetilpiridinio al 0.05% y solución de
cloruro de sodio al 0.9 % (NaCl 0.9%) fueron divididos
en diez grupos.
Los criterios de selección fueron los siguientes:
Criterios de inclusión
• Placas Petri inoculadas con cepas de
Porphyromonas gingivalis.
• Placas Petri inoculadas con cepas de Prevotella
intermedia.
• AETV al 100, 75 y 50%.
• Cloruro de cetilpiridinio al 0.05%
• NaCl 0.9%.
Criterios de exclusión
• Placas Petri inoculadas con cepas de
Porphyromonas gingivalis que presentaron
contaminación o alteración por mala incubación
o inadecuadas maniobras del operador.
• Placas Petri inoculadas con cepas de Prevotella
intermedia que presentaron contaminación y/o
alteraciones por mala incubación o inadecuadas
maniobras del operador.
• Aceites esenciales no pertenecientes a la especie
de Thymus vulgaris.
• AETV en concentraciones distintas al 100, 75 y
50%.
Distribución
• Group 1: 100% AETV en placas petri inoculadas
con Porphyromonas gingivalis.
• Group 2: 50% AETV en placas petri inoculadas
con Porphyromonas gingivalis.
• Group 3: 75% AETV en placas petri inoculadas
con Porphyromonas gingivalis.
• Group 4: 0.05% Cloruro de cetilpiridinio en
placas petri inoculadas con Porphyromonas
gingivalis.
• Group 5: NaCl 0.9% en placas petri inoculadas
con Porphyromonas gingivalis.
• Group 6: 100% AETV en placas petri inoculadas
con Prevotella intermedia.
• Group 7: 50% AETV en placas petri inoculadas
con Prevotella intermedia.
• Group 8: 75% AETV en placas petri inoculadas
con Prevotella intermedia.
• Group 9: 0.05% Cloruro de cetilpiridinio en
placas petri inoculadas con Prevotella intermedia.
• Group 10: NaCl 0.9% en placas petri inoculadas
con Prevotella intermedia.
El resultado ha sido evaluado como una
reducción en la extensión de crecimiento bacteriano en
mm.
Clasicación botánica
La clasicación taxonómica de las muestras de
la planta (Figura 1) fue llevado a cabo en el Museo de
Historia Natural de la Universidad Nacional Mayor de
San Marcos (Constancia Nº 069-2022-USM), brindando
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Figura 1
Selección de la materia prima de Thymus vulgaris
Figura 2
Procedimiento de obtención y disolución del aceite esencial de Thymus vulgaris
la siguiente clasicación:
• Thymus vulgaris
• Order: Lamiales
• Family: Lamiaceae
• Genre: Thymus
• Species: Thymus vulgaris L.
Preparación del aceite esencial
Se limpiaron y separaron las hojas de tomillo para su
secado en ambiente cerrado con calefactores eléctricos
a una temperatura de 60 °C por 10 días y se pesó en
balanza digital (Figura 1). Para la obtención de 20 mL de
aceite se empleó 8 kg de hojas de tomillo con el método
de destilación por arrastre empleando el equipo Soex
(Figura 2). Para destilar 500 mL se usa el solvente de
diclorometano por 3 horas a temperatura de 100 °C. Para
obtener las concentraciones de 75% y 50% se empleó el
aceite de Soya como diluyente.
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Siembra microbiológica y medición
Las cepas bacterianas se adquirieron en el
Laboratorio Genlab del Perú SAC con certicado de
análisis. La Porphyromonas gingivalis ATCC 33277 y
la Prevotella intermedia ATCC25611 fueron sembradas
en 10 placas petri cada una, previamente preparadas con
agar sangre. Luego se procesaron en una incubadora
a 37°C por 96 horas donde la turbidez demostró el
crecimiento de la cepa. Después, se prepararon cinco
discos por cada placa petri: 1) AETV 100%, 2) AETV
75%, 2) AETV 50%, 3) Cloruro de cetilpiridinio
0.05%, y 4) NaCl 0.9%. (Figura 3). Las mediciones se
realizaron a las 24, 48 y 72 horas horas, utilizando the
Kirby–Bauer disk diusion method con un Calibrador
Digital (Ubermann; Santiago, Chile) de 300 mm.
Figura 3
Placas Petri con los discos donde se observa los halos de inhibición
Análisis estadístico
Los datos fueron recolectados en una base de
datos en una hoja de cálculo Microsoft Excel 2016,
luego se utilizó el paquete estadístico STATA versión
11 donde se analizaron para responder las preguntas
de investigación formuladas. Se empleó la prueba de
Shapiro - Wilk. Para el análisis inferencial, se realizó
el test U de Mann-Withney para la comparación de los
grupos, con un nivel de signicancia p<0.05.
Resultados
Los resultados de la investigación realizada
demuestran que la ecacia antibacteriana del aceite
esencial de Thymus vulgaris (tomillo) sobre cepas de
bacterias de Porphyromonas gingivalis y Prevotella
intermedia, varía de acuerdo a la concentración del
aceite y al tiempo del experimento, esto es también
en comparación con el control positivo Cloruro de
cetilpiridinio 0.05%, a continuación en las siguientes
tablas se detalla las mediciones promedios de los halos
de inhibición en concentraciones al 100%, 75% y 50%
cuyo tiempo fue a las 24, 48 y 72 horas.
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Tabla 1
Comparación in vitro de la efectividad antibacteriana del aceite esencial de Thymus vulgaris (Tomillo) contra
Porphyromonas gingivalis (ATCC33277) a las 24, 48 y 72 horas
Nota. Todos los grupos fueron medidos en mm
*Shapiro-Wilk test. P>0.05 para signicancia estadística
En la Tabla 1, se observa la medición a las 24
horas, la actividad antimicrobiana sobre Porphyromonas
gingivalis en el grupo control de Cloruro de Cetilpiridinio
al 0.05% fue de 10.7 ± 0.27 mm, mientras que con el
aceite esencial de Thymus vulgaris en la concentración
del 100% fue de 28.56 ± 0.61 mm. En la concentración
de 75%, fue de 21.76 ± 1.04 mm, seguidamente de la
concentración del 50% con una lectura promedio de
14.22 ± 0.76.
En la medición a las 48 horas, la actividad
antimicrobiana sobre Porphyromonas gingivalis en el
grupo control de Cloruro de Cetilpiridinio al 0.05% fue
de 10.51 ± 0.09 mm, mientras que con el aceite esencial
de Thymus vulgaris en la concentración del 100% fue
de 29.5 ± 0.46 mm. En la concentración de 75%, fue de
24.01 ± 0.29 mm, y nalmente en la concentración del
50% con una lectura promedio de 15.98 ± 0.33.
En la medición a las 72 horas, la actividad
antimicrobiana sobre Porphyromonas gingivalis en el
grupo control de Cloruro de Cetilpiridinio al 0.05% fue
de 10.38 ± 0.07 mm, mientras que con el aceite esencial
de Thymus vulgaris (Tomillo) en la concentración del
100% fue de 29.6 ± 0.46 mm. En la concentración
de 75%, fue de 25.55 ± 0.40 mm, seguidamente de la
concentración del 50% con una lectura promedio de
18.10 ± 0.32.
Tabla 2
Comparación in vitro de la efectividad antibacteriana del aceite esencial de Thymus vulgaris (Tomillo) contra Prevotella
intermedia (ATCC25611) a las 24, 48 y 72 horas
Nota. Todos los grupos fueron medidos en mm
*Shapiro-Wilk test. P>0.05 para signicancia estadística
En la tabla se demuestra la medición a las 24
horas, la actividad antimicrobiana sobre Prevotella
intermedia en el grupo control de Cloruro de
Cetilpiridinio al 0.05% fue de 14.09 ± 0.38 mm, mientras
que con el aceite esencial de Thymus vulgaris (Tomillo)
en la concentración del 100% fue de fue de 31.63 ± 1.27
mm. En la concentración de 75%, fue de 23.43 ± 1.37
mm, y nalmente en la concentración del 50% con una
lectura promedio de 21.21 ± 0.88.
En la medición a las 48 horas, la actividad
antimicrobiana sobre Prevotella intermedia en el grupo
control de Cloruro de Cetilpiridinio al 0.05% fue de
13.64 ± 0.31 mm, mientras que con el aceite esencial
de Thymus vulgaris (Tomillo) en la concentración del
100% fue de 32.31 ± 0.56 mm. En la concentración
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de 75%, fue de 25.33 ± 0.43 mm, y nalmente en la
concentración del 50% con una lectura promedio de
22.48 ± 0.37.
En la medición a las 72 horas, la actividad
antimicrobiana sobre Prevotella intermedia en el grupo
control de Cloruro de Cetilpiridinio al 0.05% fue de
Tabla 3
Comparación in vitro de la efectividad antibacteriana del aceite esencial de Thymus vulgaris (Tomillo) contra
Porphyromonas gingivales (ATCC33277) y Prevotella intermedia (ATCC25611)
Nota. * p<0.05 para signicancia estadística.
13.43 ± 0.09 mm, mientras que con el aceite esencial
de Thymus vulgaris (Tomillo) en la concentración del
100% fue de 33.29 ± 0.58 mm. En la concentración
de 75%, fue de 27.77 ± 0.74 mm, seguidamente de la
concentración del 50% con una lectura promedio de
23.89 ± 0.68.
En la tabla 3, se realizó la evaluación de la
normalidad con el Test de Shapiro-Wilk, porque no hubo
una distribución normal de los datos en los diferentes
grupos.
Al realizar la comparación entre los grupos, se
encontraron diferencias estadísticamente signicativas
(<0.001) entre la actividad antimicrobiana del aceite
esencial de Thymus vulgaris (Tomillo) al 100%, 75%,
50 % y Cloruro de Cetilpiridinio al 0.05% frente a cepas
de Porphyromonas gingivalis y Prevotella intermedia.
Discusión
La enfermedad periodontal es caracterizada por
la destrucción de los componentes de la encia, como es:
ligamentos periodontales, el hueso alveolar y la formación
de bolsas gingivales, lo que conduce a la pérdida de
dientes. Esta infección es causada por microorganismos
como: Aggregatibacter actinomycetemcomitans,
Prevotella intermedia y Porphyromonas gingivales.
La acción antibacteriana del aceite esencial de hojas
de Thymus vulgaris sobre algunos patógenos humanos
está ampliamente documentada, los efectos de este
aceite sobre microorganismos periodontopáticos y
cariogénicos no se comprenden completamente. El
estudio de Galovičová et al. (2021) buscó comprobar
el aceite esencial de Thymus vulgaris (Tomillo) como
complemento ecaz durante la terapia periodontal
no quirúrgica para la periodontitis crónica, pero los
resultados de la acción bacteriana del Cloruro de
Cetilpiridinio al 0.05% fueron superiores a los obtenidos
por el aceite esencial de Thymus vulgaris (Tomillo) en
sus tres concentraciones.
En este estudio se comparó el efecto
antibacteriano de las diferentes concentraciones de
Aceite esencial de Thymus vulgaris sobre cepas de
Porphyromonas gingivalis y Prevotella intermedia con
el efecto antibacteriano del Cloruro de Cetilpiridinio al
0.05%, compuesto que en diferentes estudios como el de
Miranda et al. (2020), mostraron que tanto el Cloruro de
Cetilpiridinio al 0.05%, como la Clorhexidina al 0.12%
disminuyeron la actividad metabólica del biolm en un
60% (De Miranda, 2020).
Amaya et al. (2021) mencionan que podrían
llegar a ser una alternativa sostenible de manejo y
erradicación de bacterias de manera responsable con
el medio ambiente a través de los Aceites Esenciales
(AE) para así disminuir el impacto de los productos
farmacéuticos. La investigación realizada, muestra
una alternativa sostenible para el control de bacterias
periodontopatógenas, pues se observó el efecto
antibacteriano del aceite esencial de Thymus vulgaris
(Tomillo) en diferentes concentraciones y el Cloruro de
Cetilpiridinio al 0.05%. sobre cepas de Porphyromonas
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gingivalis y Prevotella intermedia (Hama et al., 2020).
En Fani et al. (2017) se observó un importante
efecto antibacteriano de una solución de 1 mg/mL de
aceite de Thymus vulgaris, en dimetilsulfóxido acuoso
al 10% que contiene 0,5% de Tween 80 (256 mg/mL)
con halos de inhibición promedio de 29.9 ± 0.8 sobre
Porphyromonas gingivalis, similares a los encontrados
en este trabajo. Los resultados concuerdan con el
estudio de Hama et al. (2020) donde el aceite esencial de
tomillo mostró un efecto inhibidor signicativo con una
concentración mínima inhibitoria (MIC) media de 6,25
µL/ml y una concentración mínima bactericida (MBC)
de 12,5 μL/ml (13). De manera similar, en el estudio
de Madhloom et al. (2023) Porphyromonas gingivalis
fue sensible a todas las concentraciones de extracto
etanólico de Thymus vulgaris, donde se obtuvo que la
MIC fue de 0,78 mg/mL y MBC de 1,56 mg/mL.
La principal limitación de esta investigación
fue la escasa literatura disponible sobre las propiedades
de estas plantas en Perú, lo que dicultó la comparación
con otros estudios, Además de evitar la contaminación
de las placas para lograr el objetivo propuesto.
Los resultados de este estudio muestran los
benecios de los productos naturales que proporcionan
una alternativa sostenible con el ambiente para el control
de bacterias periodontopatógenas como Porphyromonas
gingivalis y Prevotella intermedia, ofreciendo benecios
a la odontología y a la población de bajos recursos en el
tratamiento de la enfermedad periodontal.
Conclusiones
Se encontraron diferencias estadísticamente
signicativas ( p<0.001) entre la actividad antimicrobiana
del aceite esencial de Thymus vulgaris (Tomillo) al
100%, 75%, 50% y Cloruro de Cetilpiridinio al 0.05%
frente a cepas de Porphyromonas gingivalis y Prevotella
intermedia en diferentes tiempos a las 24, 48 y 72 horas.
El aceite de Thymus vulgaris (Tomillo) al
100%, 75%, 50%, de la medición de los halos fueron
mayores que los de Cloruro de Cetilpiridinio al 0.05% a
las 24, 48 y 72 hrs.
El aceite de Thymus vulgaris (Tomillo) tiene
actividad antimicrobiana sobre cepas de Porphyromonas
gingivalis y Prevotella intermedia, siendo estas bacterias
gran negativas y están presentes en el biolm de la
enfermedad periodontal.
Recomendaciones
Los resultados del estudio demuestran el posible
impacto de alternativas naturales para el tratamiento
de la enfermedad periodontal y que se debe indicar en
tratamientos de la enfermedad
Se recomienda realizar investigaciones de
aplicación clínica con el uso aceite esencial de Thymus
vulgaris ó tomillo.
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