Vigilancia de Escherichia coli
O157: H7 en alimentos y aguas
Monitoring Escherichia coli O157: H7 in food and water
Recibido: enero 07 de 2013 | Revisado: marzo 04 de 2013 | Aceptado: mayo 16 de 2013
César Guerrero Barrantes
Facultad de Tecnología Médica
Alfredo Guillén Oneeglio
Universidad Nacional Federico Villarreal
Roberto Rojas León
Artículo de Investigación. Facultad
de Tecnología Médica. Universidad
Na-cional Federico Villarreal. Calle
Río Chepén s/n. El Agustino. Lima -
Perú. Correo electrónico:
cesgueba@ec-red.com
Ab s t r act
Food such as ground beef, cheese, ham and lettuce are in high demand for
consumption by the population and are susceptible to pollution; the water of the
rivers are used by inhabitants of the towns nearby. In our environment, we do
not have reports on surveillance studies of E. coli O157: H7 in samples of
waters of the Rimac River East and food markets of Lima. For the evaluation of
food we proceeded as indicated by Feng & Weagant (2002) and for the wa-ter
evaluation 50 mL of sample was added to 150 mL of concentrated double
TSBm and incubates at 37 ° C for 18 h and transferred to a Mac Conkey agar
and incubated at 37 ° C for 24 hours. We selected 5 lactose positive colonies
sample and identified as E. coli, as well as their inability to use sorbitol and
determination of the antigen somatic O157 and flagellar H7, confirmingE. coli
O157H7. From 309 samples of foods, 82 lettuce, 76 cheeses, 76 ham and 75 of
ground beef, processed, 187 were positive for E. coli (60.5%), corresponding to
47 from lettuce, 60 from fresh cheese, 48 from ham and 32 from ground beef;
whereas from the 75 samples of river water processed, 36 were positive for E.
coli (48%). From 223 E. coli strains, five (5) cultures were positive for E. coli
O157: H7, corresponding to 2 from lettuce (2.4%) and 3 from ground beef
(4%). We did not detect E. coli O157: H7 in samples of water, ham and cheese.
Lettuce may represent the High-risk food in the transmission of E. coli O157:
H7 to mankind, followed meat, due to by cross-contamination or bad cooking.
Keywords: E. coli O157: H7, food, water
Re su m e n
Los alimentos como la carne molida de vacuno, queso, jamón y lechuga son de
alta demanda de consumo por la población y son susceptibles de contamina-
ción. Así mismo, las aguas de los ríos son usadas por pobladores de las riberas.
En nuestro medio, no contamos con reportes sobre estudios de vigilancia de E.
coli O157:H7 en muestras de aguas del río Rímac este, ni en alimentos en los
mercados de Lima. Para la evaluación de alimentos se procedió como lo des-
cribe Feng & Weagant (2002) y para aguas se utilizó 150 mL de la muestra con
150 mL de TSBm doble concentrado e incubado a 37ºC por 18 h y transferido a
agar Mac Conkey e incubado a 37ºC por 24 h. Se seleccionaron 5 colonias
lactosa positiva por muestra e identificadas como E. coli, así como su incapa-
cidad para utilizar el sorbitol y la determinación del antígeno somático O157 y
el flagelar H7, confirmándose E. coli O157:H7. De las 309 muestras de alimen-
tos, 82 lechugas, 76 quesos, 76 jamón y 75 de carne molida, procesadas, 187
resultaron positivas para E. coli (60,5%), correspondiendo a 47 provenientes de
lechugas, a 60 de queso fresco, a 48 de jamón y a 32 de carne molida; mientras
que de las 75 muestras de aguas de río procesadas, 36 resultaron positivas para
E. coli (48%). De 223 cultivos de E.coli evaluados, cinco (5) cultivos fueron
positivos para E. coli O157:H7, correspondiendo a 2 de lechugas (2,4%) y 3 de
carne molida (4%). No se detectó E. coli O157:H7 en muestras de aguas, jamón
y queso. La lechuga puede representar un alimento de alto riesgo en la trans-
misión de E. coli O157:H7 al hombre, seguido de la carne, por contaminación
cruzada o por mal cocimiento.
Palabras claves: E. coli O157:H7, alimentos, aguas
| Cátedra Villarreal | Lima, perú | V. 1 | N. 1 | 35-45 | enero -junio | 2013 | issn 2310-4767 35
César Guerrero Barrantes, Alfredo Guillén Oneeglio, Roberto Rojas León
Introducción
El grupo de Escherichia coli Enterohemo-
rrágica (ECEH) ha emergido como causal de
colitis hemorrágica en humanos. Esta enfer-
medad se caracteriza por dolor abdominal y
diarrea sanguinolenta que puede devenir en una
complicación más severa conocida como
síndrome urémico hemolítico (SUH). La pa-
togenicidad de ECEH está asociada a un nú-
mero de factores de virulencia, incluyendo la
producción de citotoxinas (Griffin y Tauxe,
1991) que son referidas como verotoxinas o
toxina “shiga” (TS) por su similitud a la toxina
Shiga de Shigella dysenteriae tipo 1. Más de 60
serotipos de E. coli producen TS y el seroti-po
predominante y frecuentemente aislado en este
grupo de ECEH es el O157:H7 (en menor
proporción O157:NM, variante inmóvil de este
serotipo) y su transmisión está asociada,
frecuentemente, a los alimentos y aguas con-
taminadas. Es así que los serotipos O157: H7
son la mayor causa de enfermedades transmi-
tidas por alimentos en USA, Canadá y Europa.
En 1998, se observó en Estados Unidos una
incidencia de 2,3 por cada 100 000 habitantes
(Slutsker, Ries , Maloney, Wells, Greene , Grif-
fin,1998) , pero luego descendió a 1,1 por cada
100 000 habitantes en el 2003 (Centers for Dis-
ease Control and Prevention, Morbidity and Mor-
tality Weekly Report, 2005). Sin embargo, esta
incidencia se mantuvo en los últimos años e
incluso en el 2006 (CDC, MMWR, 2009) re-
portaron 29 brotes de infecciones por E. coli
productores de toxina “shiga” (ECTS) contra
24 que se reportaron en promedio entre 2001 y
2005, de los cuales 27 fueron causados por
O157, uno por O121 y el último por el serotipo
O26, responsable de 592 enfermos (contra 470
que se reportaron en promedio entre el 2001 al
2005). En Alemania (Beutin , Krause , Zim-
mermann , Kaulfuss y Gleier , 2004) demostraron
el aislamiento de cultivos de E. coli portadores
de toxina “shiga” que correspondía a varios se-
rotipos, siendo el más frecuente el O157:H7.
La notoriedad de los recientes brotes
y la severidad de la infección del serotipo
O157:H7 ha estimulado las investigaciones
sobre ecología, resistencia antibiótica y facto-
res de virulencia de esta bacteria (Armstrong,
Hollingsworth y Morris, 200 6).Las infeccio-
nes transmitidas por alimentos del serotipo
O157:H7 han estado siempre asociados con el
consumo de productos bovinos. Sin embargo,
varios brotes recientes han comprometido a
otros alimentos y a las aguas superficiales.
La creciente preocupación acerca de la
transmisión de microorganismos patóge-nos
por los alimentos lleva a la necesidad de
controlar toda la cadena alimentaria, desde el
producto primario hasta el consumidor, ob-
servándose especialmente a las carnes,
quesos, embutidos y a los productos frescos,
que son consumidos con una preparación
mínima o producidos de manera artesanal.
El agua de riego o de río, en particular,
constituye una vía importante de contami-
nación para los productos frescos (Wachtel,
Whitehand y Mandrell ,2002). La detección
fia-ble de organismos patógenos en los
productos alimenticios y el seguimiento de
estos ayuda-rá a la prevención de brotes de
enfermedades asociadas con aguas y
alimentos contamina-dos.
Los brotes de colitis hemorrágica y síndro-
me urémico hemolítico ocurridos en 1982 en los
Estados Unidos (Riley, Remis, Helgerson, McGee,
Wells , Davis,1983) se asocian a los ali-mentos,
especialmente a las hamburguesas (CDC-
MMWR, 1993) como transmisor de E. coli
productores de verotoxinas o toxina “shi-ga”.
Asimismo, esta toxiinfección se ha rela-cionado
con el consumo de lechuga (Ackers , Mahon ,
Leahy , Goode , Damrow, Hayes , 1998), aguas
(Olsen , McKee, Fox , Bibb y Mead , 2002), carne
de res (Radu , Mutalib , Rusul , Ahmad , Morigaki ,
Asai ,1998), leche cruda y productos lácteos
(Wells,Shipman , Greene, Sowers, Green, Cameron
,1991), siendo estos últimos conside-rados como
reservorios naturales. A inicios de 1993, el
serotipo O157:H7 recibió conside-rable
atención después de un gran brote por consumo
de hamburguesas contaminadas,
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Vigilancia de Escherichia coli O157: H7 en alimentos y aguas
mal cocidas, servidas en un restaurante de co-
mida rápida; se registraron más de 700 perso-
nas infectadas en cuatro estados, con 51 casos
de SUH y cuatro decesos, tal como fue repor-
tado por el CDC en 1993; esto ha permitido
aumentar el interés, la vigilancia y despertar la
atención de médicos, microbiólogos y consu-
midores. Quince brotes adicionales se regis-
traron en 1993 y veinte en el primer semestre
del año 1994 y así como sucesivos casos se han
dado en los últimos años por consumo de
hamburguesas mal cocidas, señalados en un
estudio por Slutsker et. al. (1998) y de lechu-
gas, publicado por Ackers et. al. (1998).
Luego de una visita a una granja lechera en
Pensilvania y Washington durante el año 2000
(Gage , Crielly , Baysinger, Chernak, Her-bert y
Johnson-Entsuch ,2001), reportaron que 56
personas presentaron fiebre, vómitos y dia-rrea,
algunos con sangre y solo una con sinto-
matología del SUH. Se aisló las heces de 15 de
ellas, E. coli O157:H7. Las cepas aisladas tu-
vieron el mismo patrón de PFGE (tipificación
molecular por electroforesis en gel en campo
pulsante) y produjeron Verotoxina 1 (TS1) y
Verotoxina 2 (TS-2). Ante eso se evaluaron 216
muestras de heces de ganado vacuno de dicha
granja, de los cuales 28 presentaron E. coli
O157:H7, cuyo patrón PFGE fue similar a la de
las cepas aisladas desde los pacientes.
Las ferias agrícolas donde se exhiben ga-
nado (vacuno, porcino, caprino, ovino) jue-gan
papel importante en la prevalencia de E.
coliO157:H7 productores de toxina “shiga” y
su persistencia en el medio ambiente por va-rios
meses (Keen, Wittum, Dunn, Bono, y Durso ,2006).
Adicionalmente, (Rosser, Dransfield, Al-lison,
Hanson, Holden, Evans ,2008) han reporta-do la
emergencia de una variedad inmóvil del
serotipo O157 capaz de fermentar el sorbitol
(característica inusual en la variedad móvil,
O157:H7).(Bhat,Denny, MacDonald, Hofman
, Jain , y Lynch ,2007) reportaron cuatro casos
de infección por E. coli O157:H7 asociado al
consumo de leche cruda en Oregon, Estados
Unidos, mientras que (Grant, Wendelboe , Wen-
del , Jepson , Torres , Smelser ,2008) presentaron
la investigación sobre un brote sucedido en
los estados de Utah y Nuevo Mexico, causado
por Escherichia coli O157:H7, en 22 pacien-
tes (caso-control) que consumieron espinaca
embolsada, desde donde se aisló la bacteria
(en tres de ellas de una misma marca) y a ni-
vel nacional, 205 personas enfermaron con la
cepa del brote. E. coliserogrupo O157:H7 fue
demostrado en un estudio realizado en car-nes
de ganado vacuno en un camal de Lima
(Guerrero C., Guillén A., Rojas R. y Meza R. ,2002)
aislándose 2 cultivos sorbitol negativo,
desde 80 muestras estudiadas. Sin embargo,
solo una de ellas, a través de la prueba de
PCR, demos-tró poseer la secuencia
genética que codifica la verotoxina.
Se ha reportado brotes de diarreas por E. coli
productores de toxina shiga, transmitidos por
aguas de regadío y la subsecuente con-
taminación a los alimentos (Wachtel, White-hand
y Mandrell ,2002) , así como también por agua de
consumo, como la ocurrida en Esta-dos Unidos
en 1998, asociada con el seroti-po O157:H7
(Olsen, McKee , Fox, Bibb y Mead ,2002) y
también con el serotipo O121:H19, con la TS-2
(Tarr, Large, Moeller , Lacher , Tarr
, Acheson, 2002). En Argentina, (Tanaro, Lound
y Domínguez , 2006), reportaron el aislamiento
de cultivos de E. coli O157H7 desde aguas de
río, pues el agua ha sido asociada a brotes o
casos aislados de enfermedades causadas por
E. coli O157H7 (Bopp, Brenner , Fields,
Wells y Strockbine ,2003) .
El agua se considera también un vehículo
potencial en la contaminación de hortalizas,
donde especialmente la lechuga ha sido com-
prometida (Wachtel et. al. 2002), constituyén-
dose en un problema de salud pública latente.
Las aguas superficiales, como las de los ríos
que bañan las comunidades son usadas por los
pobladores para sus actividades domésticas
diarias y dan lugar a una constante contami-
nación, más aún si los desechos o las aguas
servidas son arrojados en su lecho, transfor-
mándose en una fuente importante de trans-
misión y diseminación de bacterias patógenas
hacia el hombre. Últimamente, en Alemania,
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César Guerrero Barrantes, Alfredo Guillén Oneeglio, Roberto Rojas León
se presentó la ocurrencia de un brote con cua-
tro casos fatales donde E. colienteroagrega-
tiva serotipo O104:H4, productor de toxina
“shiga” estuvo implicado (Scheutz, Møller, Fri-
modt-Møller, Boisen, Morabito, Tozzoli ,2011).
Al margen del aislamiento de E. coli
O157:H7 productor de verotoxina, reportado
por (Huapaya , Huguet , Suárez , Torres , Montoya
, Salazar ,2001), en nuestro país, en un caso de
diarrea disentérica, no se han dado infeccio-
nes de consideración causados por algún se-
rotipo de E. coli Enterohemorrágico, como ya
han reportado desde Chile (Prado,1995),
Argentina (Rivas , Voyer, Tous , Leardini , Mena
, Wainsztein ,1993) y en Brasil (Guth , López de
Souza , Vaz e Irino ,2002). Pero estamos a expen-
sas de que pueda ocurrir en algún momento, lo
que obliga a persistir en la investigación de este
microorganismo para contribuir a la pre-vención
de un eventual brote, E. coli serotipo O157:H7, a
diferencia del resto de cultivos de esta misma
especie, que no utilizan el sorbi-tol y no poseen
la enzima glucoronidasa (Rat-nam , March,
Ahmed, Bezanson y Kasatiya ,1988), características
que son aprovechadas para su identificación
presuntiva y ser confirmada con la prueba
serológica.
La notoriedad de los recientes brotes y la
severidad de las infecciones por el serotipo
O157:H7 ha estimulado la investigación del
microorganismo, su ecología, la resistencia
antibiótica y sus factores de virulencia. Los
estudios realizados sobre E. coli, productor de
verotoxinas nos da una idea del problema la-
tente de esta variante patógena de E. coli,
como el O157:H7. En nuestro medio no
contamos con reportes sobre algún brote de
colitis he-morrágica o síndrome urémico
hemolítico, excepto el aislamiento de un caso
de diarrea disentérica en un niño, en Tacna,
como lo re-porta Huapaya et al. (2001).
Por la gravedad de la enfermedad, capaz
de causar esta variante patógena de E. coli es
preciso plantear un programa de vigilancia y
prevención, estudiando el posible peligro de
contaminación de algunos alimentos más sus-
ceptibles, como las carnes, productos lácteos,
verduras y aguas que al ser consumidos cru-
dos o mal cocidos por el hombre puedan oca-
sionar algún brote de impacto en nuestra so-
ciedad, que después tengamos que lamentar.
Por lo expuesto, resulta necesario examinar
muestras de alimentos, como la carne molida
de vacuno, jamón, lechuga y aguas, con la fi-
nalidad de tomar medidas necesarias de salud
pública para reducir el riesgo de infección y
prevenir la ocurrencia de algún brote.
Los alimentos como la carne molida de
vacuno, queso, jamón y lechuga tienen ele-
vada demanda de consumo en la población
y son susceptibles a contaminación; ya que
son producidos, cosechados y
transportados, por lo general,
artesanalmente. Así mismo, las aguas de los
ríos son usadas por los poblado-res de las
riberas en sus diversas actividades diarias.
En nuestro medio, no contamos con re-
portes sobre estudios de vigilancia de E. co-
liO157:H7 en muestras de aguas de río y de
alimentos como la carne molida, queso, jamón y
lechugas de expendio en los principales mer-
cados de Lima. Surge la pregunta: ¿O157:H7
estará contaminando las aguas del río Rímac y
los alimentos como carne molida, quesos,
jamón y lechuga de los mercados de Caquetá y
La Parada? Por lo tanto, es necesario exami-nar
estas muestras en la búsqueda del men-cionado
organismo patógeno para el hombre,
planteándose la hipótesis de que, efectivamen-
te, O157:H7 se encuentra contaminando el agua
del río Rímac y estos alimentos de mucha
demanda en nuestra comunidad y que estos, a su
vez, son un medio importante en la trans-misión
de la bacteria.
La infección intestinal causada por los cul-
tivos patógenos de E. coli es una de las más
frecuentes en nuestro medio. Afecta preferen-
temente a los niños (Beutin L., et.al., 2004),
causando diarreas sanguinolentas, en algu-nos
casos, con la consecuente deshidratación,
desnutrición y poniendo en riesgo la vida, es-
pecialmente si la causa es un serotipo como el
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Vigilancia de Escherichia coli O157: H7 en alimentos y aguas
O157:H7, que generalmente podría ser trans-
mitido por aguas y/o alimentos (Bhat, Denny,
MacDonald, Hofman, Jain, y Lynch. ,2007; Wer-
ber,Beutin, Pichner, Stark, y Fruth ,2008). La de-
tección fiable de microorganismos patógenos
como E. coli O157:H7 en las aguas de río y en
los productos alimenticios y el seguimiento de
estos ayudará a la prevención de brotes causa-
dos por esta bacteria.
En estudios previos, realizados en lechu-
gas, quesos y jamón (Guerrero et al, 2003), se
pudo observar una alta contaminación en
estos alimentos por E. coli y se detecta-ron
algunos serogrupos patógenos de esta
bacteria, estableciéndose la posibilidad que el
serotipo O157:H7 podría ser uno más de
estos. La presencia de esta bacteria en las
aguas de río y alimentos como la carne
molida de vacuno, queso, jamón y lechugas
permitiría precisar el grado de riesgo al que
estaría expuesta nuestra comunidad, prin-
cipalmente los niños, y establecer una vía de
transmisión importante, considerando el
grado de contaminación de estos productos y
las condiciones inadecuadas de salubri-dad e
higiene en la producción artesanal y expendio
de muchos alimentos, de manera común en
nuestro medio, considerándose como un
aspecto importante la vigilancia y monitoreo
de esta bacteria, para evitar la posibilidad de
emerger como causa de algún brote
epidémico y comprometer la salud de la
comunidad más expuesta que es, por lo
general urbano marginal, contribuyendo al
conocimiento en salud pública respecto de la
cadena epidemiológica de la infección, donde
E. coli O157:H7 puede ser transmiti-do por el
agua del río Rímac y los alimentos
mencionados.
Por ello, planteamos como objetivo la de-
terminación de la presencia de E. coli O157:
H7 como contaminante de alimentos y aguas
de río en la ciudad de Lima, tratando de esta-
blecer el riesgo potencial de las aguas del río
Rímac y los alimentos de expendio en los
mer-cados como posibles transmisores de E.
coli O157: H7 hacia el hombre.
Método
Es un estudio de tipo prospectivo y
des-criptivo, basado en la detección del
microor-ganismo en los alimentos de
expendio en los mercados de Lima y en
aguas del río Rímac, zona de Huachipa.
Participantes:
a. Ámbito temporal y espacial: son el
Mercado de Caquetá (San Martín
de Porres) y el Mercado Central, La
Vic-toria, en la ciudad de Lima; así
como también las aguas de río
Rímac, zona este, Huachipa.
Se procesaron 75 muestras de aguas
de río, 70 de carne molida, 80 de
queso, 70 de jamón y 70 de lechugas,
realizadas entre los meses de abril a
octubre del 2011. El procesamiento
de las mues-tras se realizó en el
Laboratorio de la Facultad de
Tecnología Médica (El Agustino).
b. Universo: son los alimentos de
expen-dio en los mercados de Lima,
como la carne molida de vacuno,
quesos, ja-món y lechuga; así como
las aguas del río Rímac este.
c. Unidades de análisis: carne de
vacuno molida (100 g); queso fresco
(100 g), jamón (100 g), lechuga (una
cabeza) y agua de río (300 ml).
d. Criterios de inclusión: producto
fresco, con ingreso en el día, en los
mercados mencionados; así como
aguas de río tomadas en el día.
e. Criterios de exclusión: producto
mal-tratado o no fresco, de ingreso
no re-ciente y aguas con más de 12
horas de muestreadas.
f. Método de muestreo: las muestras fue-
ron tomadas al azar simple. Para los
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César Guerrero Barrantes, Alfredo Guillén Oneeglio, Roberto Rojas León
alimentos se seleccionaron dos puestos
de venta por visita y por producto, de
los cuales se tomaron una muestra de
carne de vacuno molida, una de queso
fresco, una de jamón y otra de lechu-
ga (tomándose dos muestras por pro-
ducto y por visita); mientras que las
muestras de aguas fueron tomadas en
número de dos y por visita, desde el
río Rímac, zona este, Huachipa, a pri-
meras horas de la mañana.
Instrumentos: los materiales y/o reactivos
o aparatos indicados líneas abajo fue-ron
los necesarios para la ejecución de la
presente investigación, tanto en la
recolección o toma de muestra, como en
el transporte y procesamiento. Equipos:
1. Balanza 0,1 g - 200 g; au-toclave;
conservador (caja térmica); vórtex o
agitador; micropipetas de 10 a 100 uL;
destilador; materiales, solu-ciones y
reactivos: tips o puntas estéri-les; placas
petri; tubos de ensayo 13 x 100 mm,
tapa rosca; matraces de 1 L y 500 ml;
viales de vidrio; vasos de pre-cipitación
Beaker de 500 ml; guantes de látex;
gradillas para tubos pipetas de 1 ml,5 ml
y 10 ml; asa bacterioló-gica; Agar Mac
Conkey Sorbitol; Agar Mac Conkey;
Caldo Tripticasa de Soya Modificado
(TSBm); Caldo Triptosa Fosfato (CTF);
Caldo BHI; Agar Tri-ple azúcar Fierro
(TSI); Agar Lisina Fierro (LIA); Agar
Citrato de Simons; Agar Tripticasa de
Soya (TSA); Me-dio SIM; Medio VP-
RM; Bilis de buey; Antisuero para
antígeno somático de E. coli O157;
Antisuero para antíge-no flagelar de E.
coli H:7; glicerol; ice pack; bolsas
plásticas estériles; frascos de vidrio boca
ancha de 500 ml; viales de
polipropileno.
Procedimiento:
a. Toma de muestra: las muestras de
los alimentos fueron tomadas el día de
la visita por selección al azar simple,
desde los puestos que expenden estos
productos en los mercados de Caque-tá,
San Martín de Porres y en el merca-do
La Parada, La Victoria, Lima, entre los
meses de abril a octubre del 2011.
Se realizaron dos visitas por semana
a los mercados, recolectándose dos
muestras de cada producto por visita
(desde un mismo número de pues-
tos), en bolsas plásticas descartables
estériles, debidamente registradas
con fecha, hora y procedencia, a ra-
zón de 100 g de muestra para carne
molida de vacuno; 100 g de queso
fresco; 100 g de jamón y una unidad
o “cabeza” de lechuga. Mientras que
las muestras de agua se tomaron en
un frasco boca ancha estéril en volu-
men de 300 ml, colocándolas a 15
cm por debajo de la superficie del
agua y en contracorriente.
Las muestras fueron transportadas
inmediatamente al laboratorio, en
una caja conservadora con ice-
pack para su procesamiento.
b. Procesamiento de muestras:
b.1 Alimentos:
Inoculamos 50 g de muestra del alimento
en 450 ml de Caldo BHI, como lo descri-
be Feng y Weagant (2002), homogeniza-
mos en una licuadora con vaso invertido y
mantuvimos por 10 minutos a tempera-
tura ambiente con agitación periódica y
luego se incubó por 4 h a 37ºC.
Transferimos el contenido a un fras-co
con 450 ml de Caldo Triptosa Fos-fato
(CTP) e incubamos por 20 h a
44ºC±0,2ºC. Luego tomamos una asada
del cultivo obtenido y sembramos por
agotamiento en Agar Mac Conkey (MC)
e incubamos a 37ºC por 24 h. Seleccio-
namos al azar 5 colonias lactosa positiva
por muestra y las sometimos a pruebas
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Vigilancia de Escherichia coli O157: H7 en alimentos y aguas
bioquímicas para la diferenciación e
identificación de E. coli.
Nota: Para el caso de lechugas usando
guantes, cuidadosamente, deshojamos
la cabeza del producto, eliminando las
hojas externas marchitas o maltratadas
y colo-camos las hojas en una bolsa
plástica esté-ril hasta alcanzar el peso
de 50 g y añadi-mos diluyente.
b.2 Aguas:
Se tomó 150 ml y añadió a 150 ml de Caldo
Tripticasa de Soya con bilis (TSBm) doble
concentrado e incubado a 37ºC por 18 h.
Luego, transferimos una asada del cultivo
obtenido y se sembró por agotamiento en
un agar Mac Conkey e incubamos a 37ºC
por 24 h. Seleccionamos al azar cinco co-
lonias lactosa positivas, por muestra y las
sometimos a pruebas bioquímicas para la
diferenciación e identificación de E.coli.
b.3 Detección de cultivos de E. coli
O157:H7
Luego de haber identificado las colonias
aisladas como E. coli, tanto desde las
muestras de alimentos como de las aguas,
se procedió a sembrar en un Agar Mac
Conkey Sorbitol (MCS) para determinar
una de las características fenotípicas
im-portantes del serotipo O157:H7,
como es la incapacidad para utilizar el
sorbitol (aunque hay algunas cepas de
este seroti-po capaz de usarla).
Desde aquellas colonias que son sorbi-
tol negativas (colonias incoloras) rea-
lizamos la prueba de aglutinación para
determinación del antígeno somático
O157 y el flagelar H7, confirmándose
como tal. Los cultivos positivos seroló-
gicam ente son conservados y almace-
nados en caldo tripticasa de soya con
glicerol, para posteriores estudios con el
objetivo de la búsqueda de toxinas
“shiga” u otros factores de virulencia.
Resultados
De las 309 muestras de alimentos, 82 lechu-gas,
76 quesos, 76 jamón y 75 de carne molida,
procesados, 187 resultaron positivas para E. coli
(60,5%), correspondiendo a 47 (47/82) de ellas
aisladas desde lechugas, a 60 (60/76) des-de
queso fresco, a 48 (48/76) desde jamón y a 32
(32/75) desde carne molida; mientras que desde
las 75 muestras de aguas de río procesa-das, 36
resultaron positivas para E. coli (48%), como se
describe en la tabla 1.
Tabla 1
Aislamiento de E. coli desde muestras de alimentos y agua
Leyenda: n = número de muestras positivas para E. coli; (%) =
Porcentaje de muestras positivas con E. coli
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César Guerrero Barrantes, Alfredo Guillén Oneeglio, Roberto Rojas León
Se aislaron un total de 223 cultivos de E.
coli, desde las muestras positivas (187 ais-
ladas de alimentos y 36 de las aguas) para
este microorganismo, las cuales luego de ser
procesadas para determinar las característi-
cas bioquímicas típicas de E. coli O157:H7
y luego las serológicas, resultaron cinco (5)
cultivos positivos para E. coli O157:H7,
todas ellas provenientes de las muestras de
alimen-tos, correspondiendo a dos desde
lechugas (2,4%) y 3 desde carne molida
(4%), como se demuestra en la Tabla 2. No
se detectaron E. coli O157:H7 en muestras
de aguas, jamón y queso.
Tabla 2
Muestras de alimentos y aguas positivas para E. coli O157:H7
Leyenda: n = número de muestras positivas para E. coli; (%) =
Porcentaje de muestras positivas con E. coli
Discusión
De acuerdo a nuestros resultados, podemos
observar una elevada contaminación de los ali-
mentos evaluados por E. coli, especialmente el
queso fresco (79%) y el jamón (63%) lo que nos
demuestra las condiciones en la que estos
productos son producidos, probablemente sin
cuidados de salubridad y con una práctica in-
adecuada de manipulación y cuyo expendio se
manifiesta masivamente en los principales
mercados de Lima, como los que fueron ob-jeto
de este estudio. El nivel de contaminación
observado en los quesos se debería a que es ela-
borado de manera artesanal, a partir de leche
cruda, la que suele contaminarse con colifor-
mes provenientes de las heces del ganado.
Los embutidos, como el jamón, a pesar de
tener una etapa de cocimiento y tratamiento
con preservantes también son producidos ar-
tesanalmente, en condiciones insalubres y de
manipulación excesiva. La presencia de E. coli en
estos dos productos es inaceptable dado que son
de consumo directo (consumo sin tratamiento
previo), más aún si son destinados a la pobla-ción
infantil, haciendo presumir la posibilidad potencial
de transmitir alguna de las E. coli en-teropatógena,
como lo señalamos en un estudio previo (Guerrero
et. al., 2003). La lechuga es otro producto de
consumo masivo y directo que pre-senta
contaminación elevada por E. coli (57%),
resultado de la característica de planta de tallo
corto con cercanía al suelo y por el uso de aguas
servidas y/o contaminadas para su regadío, muy
común en los campos de cultivo de la zona de
producción. Estos niveles de contaminación de E.
coli se mantienen entre esos productos,
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Vigilancia de Escherichia coli O157: H7 en alimentos y aguas
comparados con estudios anteriores realiza-
dos en esos mismos mercados (Guerrero y
col., 2002; Guerrero y col., 2003).
En nuestro estudio se ha detectado la
presencia de E. coli O157:H7 en muestras de
carne molida en tres casos, que represen-ta el
4%, superior a lo reportado por Varela et. al.
(2008), quienes señalan el aislamiento del
1,8% de E. coli O157:H7 desde muestras de
carne picada en Uruguay. Sin embargo, la
presencia de E. coli serogrupo O157:H7, fue
demostrada en un estudio realizado en car-nes
de ganado vacuno en un camal de Lima
(Guerrero et. al., 2002) aislándose 2 cultivos
con sorbitol negativos, desde 80 muestras
estudiadas (4%), porcentaje similar a lo en-
contrado en el presente estudio. Otro de los
productos donde detectamos la presencia de
E. coli O157:H7 fue en dos casos en las lechu-
gas que representa al 2,4 de las muestras eva-
luadas de este producto. A pesar de no contar
con datos similares de aislamientos de este
microorganismo en lechugas, este producto es
un sustrato predilecto para E. coli O157:H7,
como lo señalan Wachtel et. al., (2002) y es un
transmisor importante de esta bacteria para el
hombre (Ackers et. al,1998).
Podemos concluir que la lechuga por ser un
producto de consumo directo puede represen-tar
el alimento más importante y de alto riesgo de
transmisión de E. coli O157:H7 al hombre,
seguido de la carne, por ser consumida con
tratamiento previo, pero por contaminación
cruzada o por mal cocimiento puede aumen-tar
el riesgo de este producto como transmisor
potencial para E. coli O157:H7.
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