Patrones fenotípicos de resistencia en Pseudomonas
aeruginosa de muestras clínicas a nivel de Sudamérica
Resistance phenotypic patterns in Pseudomonas
aeruginosa clinical samples in South America
Recibido: marzo 17 de 2016 | Revisado: abril 05 de 2016 | Aceptado: mayo 13 de 2016
Carlos Bolaños1 José Iannacone1,2
Ab s t r act
Pseudomonas aeruginosa Migula 1895 is a Gram
negative bacillus, not sporulated, strict aerobic, that
presents various mechanisms of resistance, where
beta-lactamases are the leading cause of resistance
to beta-lactam antibiotics. This bacterium has an
intrinsic resistance to various beta-lactams, because
it possess an AMPC chromosomal inducible
enzyme, but also because it presents an acquired
resistance of the lactamase type extended spectrum
(ESBL), carbapenemases type Klebsiella
pneumoniae carbapenmasa (KPC) and metallo
(MBL). This paper presents a review of the
phenotypic resistance patterns in P. aeruginosa
with an emphasis on information known for ten
countries in South America during the years 2003
through October 2014, which are a global problem
in hospitals that lead to therapeutic failures which
occur when not promptly reported, generating
strains of P. aeruginosa resistant to multiple drugs.
In South America, Brazil was the country that
contributed the most to the analysis with 28.6% of
the studies found. Argentina and Colombia were
the countries where the four phenotypic resistance
patterns were found: AMPC derepressed
(AMPCd), ESBL and KPC, MBL carbapenemases.
The MBL and ESBL were found the highest
prevalence with 21.9% and 18.5% respectively in
South America. In the period 2007-2010 the four
phenotypic resistance patterns AMPCd, ESBL,
KPC, MBL of P. aeruginosa were found with a
prevalence of 3.4%, 14.1%, 12.6% and 23.1%
respectively; also the method most used was the
double disc diffusion for the detection of ESBL
and MBL. It should be noted that in the countries
of Bolivia, Ecuador, Paraguay and Uruguay no
records for the analysis of the four phenotypic
resistance patterns were found.
Keywords: antibiotics, beta-lactamases,
carbapenemases, Pseudomonas aeruginosa,
bacterial resistance, South America
Re su m e n
Pseudomonas aeruginosa Migula 1895 es un bacilo
Gram negativo, no esporulado, aeróbico estricto,
además presenta diversos mecanismos de resistencia,
donde las betalactamasas son la principal causa de
resistencia para los antibióticos betalactámicos. Esta
bacteria posee una resistencia intrínseca a diversos
betalactámicos, debido a que poseen una enzima AMPC
cromosómico inducible, pero también presenta una
resistencia adquirida del tipo betalactamasa de espectro
extendido (BLEE), carbapenemasas del tipo Klebsiella
pneumoniae carbapenmasa (KPC) y
metalobetalactamasas (MBL). En este trabajo se
presenta una revisión sobre los patrones fenotípicos de
resistencia en P. aeruginosa con énfasis en la
información conocida para 10 países de Sudamérica
durante los años 2003 hasta octubre del 2014, los cuales
son un problema mundial a nivel hospitalario que llevan
a fracasos terapéuticos al no ser reportados
oportunamente, generándose cepas de P. aeruginosa
multidrogorresistentes. En Sudamérica, Brasil fue el
país que mayor aportó al análisis con 28,6% de los
estudios encontrados. Argentina y Colombia fueron los
países donde se encontraron los cuatros patrones
fenotípicos de resistencia: AMPC desreprimido
(AMPCd), BLEE y las carbapenemasas KPC, MBL.
Las MBL y BLEE fueron las de mayor prevalencia
encontrada con un 21,9% y 18,5% respectivamente en
Sudamérica. En el periodo 2007-2010 fue donde se
encontró los cuatro patrones fenotípicos de resistencia
AMPCd, BLEE, KPC, MBL de P. aeruginosa con una
prevalencia de 3,4%, 14,1%, 12,6%, 23,1%
respectivamente; además el método más usado fue el
doble disco difusión para la detección de BLEE y MBL.
Se debe resaltar que en los países de Bolivia, Ecuador,
Paraguay y Uruguay no se encontraron registros para el
análisis de los cuatro patrones fenotípicos de resistencia.
Palabras claves: Antibióticos, betalactamasas,
carbapenemasas, Pseudomonas aeruginosa,
resistencia bacteriana, Sudamérica
1 Laboratorio de Ecología y Biodiversidad Animal (LEBA), Facultad de Ciencias Naturales y Matemática. Universidad
Nacional Federico Villarreal. Av. Río Chepén s/n. El Agustino, Lima, Perú.
2 Facultad de Ciencias Biológicas. Universidad Ricardo Palma (URP).
| Cátedra Villarreal | Lima, perú | V. 4 | N. 1 | PP. 73-100 | enero -junio | 2016 | issn 2310-4767 73
Carlos Bolaños, José Iannacone
INTRODUCCIÓN
La evaluación de los patrones
fenotípicos de resistencia permite tener
una mejor interpretación de los
antibiogramas (Martínez, Mercado &
Máttar, 2003). El cual permite elegir el
antibiótico más adecuado para el
tratamiento de la infección; evitando
las fallas terapéuticas que ponen en
riesgo la salud de los pacientes, al no
evidenciarse oportunamente
determinados fenotípicos de resistencia
(Navarro Calvo, Cantón, Fernández
& Mirelis, 2011). Pseudomonas
aeruginosa Migula 1895 es el patógeno
mejor conocido dentro de los bacilos
Gram negativo no fermentadores de
glucosa (Vidal, Mensa, Almela, Olona
& Martínez, 2003). Puede provocar
infecciones graves como: neumonía,
infecciones del tracto urinario y
bacteriemia (Machain, Suárez, Ferreiro
& Ceregido, 2006). Estas infecciones
suelen ser difíciles de tratar debido a la
resistencia intrínseca que presenta P.
aeruginosa y a su extraordinaria
capacidad de adquirir mecanismos de
resistencia. P. aeruginosa es resistente,
tanto de manera natural como adquirida
a un gran número de antibióticos como:
cefalosporinas de primera y segunda
generación, tetraciclinas, cloranfenicol y
macrólidos (Howard, Scott, Packard
& Jones, 2003). Esto se debe a las
características de su membrana celular
que tiene propiedades excepcionales
de impermeabilidad (Restrepo,
Robledo, Leiderman & Botero, 2003).
Las cepas pueden transmitirse entre
ellas el material genético que media la
resistencia, incluso a partir de otras
bacterias Gram negativas como las
enterobacterias (Conejo, García,
Martínez, Picabea & Pascual, 2003).
Pseudomonas aeruginosa tiene la
capacidad de tornarse resistente en el
curso del tratamiento con antibióticos,
por el cual los mismos antibióticos son
capaces de inducir los mecanismos de
resistencia que un aislamiento tiene
latentes (Ferrero, Gómez & Reparaz,
2009). La resistencia adquirida contra
estos agentes (antibióticos) constituye el
mayor desafío para el tratamiento de
este microorganismo, especialmente
cuando está asociada con resistencia a
otra clase de antimicrobianos, tales
como aminoglucósidos y
fluoroquinolonas (Lösch, Merino &
Alonso, 2004). Por lo tanto P.
aeruginosa constituye uno de los
paradigmas en la resistencia bacteriana,
debido que pueden confluir todos los
mecanismos de resistencia e incluso
potencializarse entre sí (Carmeli,
Troillet, Eliopoulos & Samore, 1999).
Las betalactamasas son la principal
causa de resistencia a antibióticos
betalactámicos, puesto que hidrolizan el
enlace amida del anillo betalactámicos
por lo que pueden inactivar penicilinas,
cefalosporinas, monobactámicos,
carbapenemes o distintas combinaciones
de estos antibióticos (Abarca & Herrera,
2001). Los diversos mecanismos pueden
contribuir para adquirir resistencia a
betalactámicos en P. aeruginosa,
incluyendo la producción de
betalactamasas, la sobrerregulación de
sistemas de eflujo y una disminución de
la permeabilidad de la membrana
externa (García et al., 2009; Livermore,
2002). Con respecto a la producción de
betalactamasas, uno de los principales
mecanismos de resistencia a
cefalosporinas de amplio espectro es la
desrepresión mediada por la enzima
cromosomal AMPC, que es intrínseca de
esta bacteria (Piersigilli et al., 2009). No
obstante, la adquisición de elementos
genéticos móviles que codifican para
betalactamasas de espectro extendido
(BLEE), tales como serino β-lactamasas
de clase A y D de
74 | Cátedra Villarreal | V. 4 | No. 1 | enero -junio | 2016 |
Patrones fenotípicos de resistencia en Pseudomonas aeruginosa de muestras clínicas a nivel de Sudamérica
Ambler y las metalobetalactamasas
(MBL) de clase B de Ambler, son
importantes mecanismos
involucrados en la resistencia en P.
aeruginosa (Gómez, Leal, Pérez de
Gonzales & Navarrete, 2005).
Se han Identificado 75 cepas de
Pseudomonas aeruginosa carbapenems
resistentes; aisladas en muestras de
orina, sangre, tracto respiratorio en un
laboratorio de Egipto. El patrón
fenotípico MBL fue detectado en 40%
de las cepas carbapenems resistentes,
mediante el método de sinergia de doble
disco entre imipem (10μg) y 10μl de 0,5
M EDTA (ácido
etilendiaminotetraacético) (Nagwa &
Sherif, 2007).
En un total de 97 aislamientos
clínicos de P. aeruginosa recuperados
de un Hospital Universitario de Lagos
y el Hospital Nacional Ortopédico
Igbobi, Nigeria. Se encontró el 9,3%
de cepas productoras BLEE y el 2,1%
de cepas productoras MBL. Detectadas
por el método disco combinado con
amoxicilina/ácido clavulánico (20μg
/10μg) y el disco con imipenem/
EDTA (10μg /930μg) o meropenem/
EDTA (10μg /930μg), respectivamente
(Aibinu, Nwanneka & Odugbemi,
2007).
Se han analizado 128 cepas de P.
aeruginosa provenientes de pacientes
quemados en el Hospital Shahid
Motahari, Irán. Encontrando cepas de
P. aeruginosa productoras MBL en
39% del total de las cepas aisladas.
La producción de MBL se detectó
por el aumento de tamaño en la zona
del disco de ceftazidima (30μg) más
EDTA (750μg) en comparación sin
EDTA (Horieh, Zohreh, Parviz,
Mohamma & Seyed, 2008).
Se han aislado 240 cepas de
P.
aeruginosa procedentes de muestras
como: secreciones respiratorias, orina,
tejido, sangre de los pacientes en unidad
de cuidados intensivos, India.
Identificaron cepas de P. aeruginosa
productoras de MBL en 28%, detectadas
mediante una agrandamiento alrededor
de la zona del disco de imipenem (10μg)
y meropenem (10μg) impregnados con
disco 0,5M EDTA (5μg) en
comparación sin el disco 0,5M EDTA
(5μg) (Varaiya, Kulkarni, Kulkarni,
Bhalekar & Dogra, 2008).
Se han aislado 29 cepas de
Pseudomonas sp. y 66 cepas de
Acinetobacter sp. recolectadas en el
Hospital Roosevelt de Guatemala,
provenientes de muestras de aspirado
traqueal y secreciones. El estudio reveló
que el 65,5% cepas de Pseudomonas sp.
fueron productoras de MBL y el 33,3%
cepas de Acinetobacter sp. presentó
MBL, determinadas las cepas
productoras de MBL mediante el uso de
disco de EDTA y carbapenemicos
(Espinoza, 2010).
En aislamientos de muestras de
líquido pleural, orina, aspirado traqueal,
tubo endotraqueal, sangre de pacientes
en un hospital de Manipal, India se han
identificado 94 cepas de P. aeruginosa
de las cuales el 74,5% fueron cepas con
patrón fenotípico MBL, utilizando
discos de meropenem (10μg) y
meorpenem/EDTA (10μg/930μg) para
su detección (Bareja et al., 2011).
En Lituania se ha realizado una
comparación a partir de los aislados
clínicos de P. aeruginosa productoras de
MBL en muestras de aspirado
bronquioalveolar, mediante el uso E-test
dentro de un periodo de cinco años. En
2003, en el estudio de las 90 cepas de P.
aeruginosa fueron resistentes a
imipenem en 53,3% y productoras de
MBL en 15,8%. En 2008, incrementó a
| Cátedra Villarreal | V. 4 | No. 1 | enero -junio | 2016 | 75
Carlos Bolaños, José Iannacone
87,8% las cepas resistentes a
imipenem y las cepas productoras de
MBL aumentó a 61,9% (Vitkauskienė,
Skrodenienė, Dambrauskienė, Bakšytė,
Macas & Sakalauskas, 2011).
En un total de 90 aislados clínicos
de P. aeruginosa que fueron identifica-
dos en el Laboratorio de Microbiología
Médica del Hospital Universitario,
Ibadan, Nigeria, se encontró que el
22% resultó productor de BLEE. La
detec-ción de BLEE fue por la sinergia
de doble disco. Encontrándose en el
40% de muestras de esputo y el 60%
de muestras de orina (Olukemi &
Alaba, 2012).
En la India se aislaron 67 cepas de
P. aeruginosa; las cuales fueron
tamizadas en busca de producción de
MBL, me-diante una prueba de disco
combinado imipenem/meropenem-
EDTA encon-trándose que el 70,1%
eran productores de MBL (Arunagiri,
Sekar, Sangeetha & John, 2012).
Se han aislado 220 cepas de P. aeru-
ginosa multidrogorresistente de pa-
cientes con quemaduras en Irán. Re-
sultando el 18% de cepas productoras de
BLEE, detectados mediantes discos de
cefotaxima (30μg) o ceftazidima (30μg)
en comparación con la zona de
inhibición de discos de cefotaxima/áci-
do clavulanico (30μg/10μg) o ceftazi-
dima/ácido clavulánico (30μg/10μg).
Pero también el 38% de las cepas fueron
productoras de MBL, detectadas medi-
ante uso de discos de imipenem (10μg) y
imipenem/EDTA (Vahdani, Azimi,
Asghari, Bazmi & Rastegar, 2012).
En un total de 92 aislamientos de ce-
pas de P. aeruginosa que fueron identi-
ficadas en un Hospital Infantil de Méxi-
co, se encontraron el 44,8% de las cepas
productoras de MBL. La producción de
MBL fue detecta usando los discos de
imipenem y meropenem solos en com-
paración con discos en los cuales se les
agregó EDTA (Ochoa et al., 2013).
Se han encontrado un total de 58 ce-
pas de P. aeruginosa aisladas de mues-
tras de orina, esputo, heridas y pacientes
quemados en Egipto. Se identificaron
cepas con patrón fenotípico BLEE en
27,5% y cepas con patrón fenotípico
MBL en 31%. Se detectaron por méto-
do de sinergia de doble disco y el méto-
do de discos combinados de imipenem
(10μg) o meropenem (10μg) solos con
imipenem más EDTA o meropenem más
EDTA, respectivamente. Además las
muestras aisladas de heridas y que-
maduras tuvieron mayor prevalencia en
los patrones fenotípicos (Rehab, Nehal
& Gamal, 2013).
Se identificaron 50 aislamientos de P.
aeruginosa en un hospital de Egipto,
obtenidos de pacientes hospitalizados y
pacientes UCI (unidad de cuidados in-
tensivos), resultando el 82% de las cepas
de P. aeruginosa con patrón fenotípico
MBL, empleando el método de disco
combinado entre imipenem (10μg) y el
disco imipenem/EDTA (10/292μg) y el
método E-test (Diab et al., 2013).
En Sudamérica, el principal prob-
lema es que no cuenta con un orde-
namiento y sistematización de datos en
cuanto a la evaluación de los fenotipos
de resistencia en P. aeruginosa, debido
a que se dispone de un número limit-ado
de datos acerca de la magnitud a este
problema. La falta de una adecua-da
interpretación de los antibiogramas,
impide tener una estrecha vigilancia de
los perfiles de resistencia de P. aerugi-
nosa. El cual ayudaría a orientar el trat-
amiento con los antibióticos, en rel-
ación con el mecanismo de resistencia
que presenten. La importancia científi-
ca de esta investigación radica en dar a
conocer los diversos patrones fenotípi-
76 | Cátedra Villarreal | V. 4 | No. 1 | enero -junio | 2016 |
Patrones fenotípicos de resistencia en Pseudomonas aeruginosa de muestras clínicas a nivel de Sudamérica
cos de resistencia en P. aeruginosa que
se debe tener en consideración al inter-
pretar los antibiogramas para disminuir
el fracaso de la terapia antimicrobiana.
En salud pública, en la reducción del
aumento de la morbimortalidad por el
uso excesivo de antimicrobianos de
amplio espectro. A nivel socioeco-
nómico para poder disminuir los cos-tos
de la atención médica y además del
empleo de antibióticos menos costo-sos.
En medio ambiente debido a los
cuidados que se deben tenerse con los
desechos médicos, aguas servidas los
cuales les permite adquisición y disem-
inación de genes resistentes a los anti-
microbianos con mayor intensidad. Por
lo tanto, resulta indispensable la con-
tención del problema. La etapa inicial de
la contención es conocer la magni-tud
de la resistencia bacteriana, lo que en
Sudamérica ha resultado difícil por
carecer de un sistema de registro, uni-
ficado y de gran cobertura. El objeti-vo
del presente trabajo fue evaluar los
patrones fenotípicos de resistencia en
Pseudomonas aeruginosa de muestras
clínicas a nivel de Sudamérica.
MÉTODO
Materiales
La búsqueda se realizó a través de Goo-
gle académico utilizando de la página 1
hasta el 15, en Scielo Argentina, Sci-elo
Perú, Scielo Chile, Scielo Colombia,
Scielo Brasil, Scielo Venezuela, Scielo
Bolivia, Scielo Ecuador, Scielo Uruguay,
Scielo Paraguay, en Dialnet, EBSCO,
DOAJ, Tesis, en revistas electrónicas de
REDALYC (Red de revistas científicas de
América Latina, el Caribe, España, y
Portugal) se revisó en las páginas del 1 al
20, en revistas especializadas como:
enfermedades infecciosas y microbi-
ología clínica (EIMC), Elsevier, Revis-ta
PubMed, Revista chilena de infec-tología,
Revista peruana de medicina
experimental y salud pública,
Revista Argentina de microbiología,
Revista Panamericana de la Salud.
El periodo de la búsqueda fue del
2003 hasta oc-tubre del 2014.
Procedimiento
Se examinó la información principal-
mente utilizando las siguientes palabras
claves en español; Pseudomonas aerugi-
nosa, taxonomía, morfología, fisiología,
distribución, patogénesis, factores de
virulencia, epidemiologia, antibióti-cos
beta-lactámicos, betalactamasas,
resistencia bacteriana, BLEE, AMPC,
Carbapenemasas, detección fenotípica.
De igual forma se buscó la información
utilizando las siguientes palabras claves
en inglés como Pseudomonas aerugino-
sa, taxonomy, morphology, physiology,
distribución, pathogenesis virulence
factors, epidemiology, beta-lactam an-
tibiotics, beta-lactamases, bacterial re-
sistance, ESBL, AMPC, Carbapenemas-
es, phenotypic detection. Para obtener un
mayor conocimiento en cuanto a los
diversos patrones fenotípicos de resis-
tencia en P. aeruginosase revisó man-
uales del Instituto de Estándares Clíni-
cos y de Laboratorio (CLSI), Comité de
Elaboración de Manual Estandarizados
en Microbiología Clínica (CEMMIC),
Manual de Procedimientos para la
Prueba de Sensibilidad Antimicrobi-ana
por el Método de Disco Difusión. En el
análisis se evaluaron los diferentes
patrones fenotípicos de resistencia en
Sudamérica por países y periodos de
tiempo, además se excluyeron los pa-
trones fenotípicos de resistencia en P.
aeruginosa por eflujo y porinas por no
ser enzimáticos, además por presentar
baja sensibilidad y especificidad para su
detección fenotípica.
| Cátedra Villarreal | V. 4 | No. 1 | enero -junio | 2016 | 77
Carlos Bolaños, José Iannacone
RESULTADOS
Pseudomonas aeruginosa
Características generales
Pseudomonas aeruginosa es un bacilo
Gram negativo, no esporulado, aeróbico
estricto, perteneciente al género Pseu-
domonas y a la familia Pseudomonad-
aceae. Es una bacteria no fermentadora
de glucosa, móvil gracias a un flagelo
único, oxidasa positiva, produce pig-
mentos fluorescentes como: la piover-
dina, piocianina y piorrubina (Mandell,
Gordon, Balbachan & Bennet, 2002).
Además emite un olor dulzón en el me-
dio de cultivo y tiene la habilidad carac-
terística de crecer a 42ºC (Koneman et
al., 2008).
Pseudomonas aeruginosa tiene una
gran cantidad de pigmentos involucra-
dos en mecanismos de competencia con
otros microorganismos y virulen-cia en
huéspedes humanos y animales, de los
cuales se destacan los siguientes: la
piocianina, que es un pigmento no
fluorescente de coloración azul verdo-so
exclusivo de la especie, pero genera-do
únicamente por el 50% de las cepas
clínicas, muy soluble en agua y de olor
característico a uvas; la pioverdina, cuya
fluorescencia puede ser apreciada a
400nm entre blanco y azul verdoso; y la
piorubina, que posee una coloración roja
pero que no es producida por mu-chas
cepas (Farías, Medina & Chavar-ría,
2005; Kong et al., 2005).
El desplazamiento de la bacteria es de
acuerdo a la viscosidad del medio en el
que se encuentra: en medios líquidos, la
motilidad se da gracias al flagelo y se
denomina “swimming”; para medios
sólidos, la movilidad se da por el me-
canismo llamado “twitching” en donde
las fimbrias o pili tipo IV permiten la
adhesión y posterior infección en las
células epiteliales del huésped; y para
medios semisólidos, el mecanismo se
denomina “swarming” con una canti-
dad de agua de 0,4 – 0,7 % (P/V), en el
cual las células se vuelven alargadas y
con más de un flagelo lo cual permite
un movimiento concertado de las mis-
mas, esta motilidad es la más compleja
(Soberón, 2003).
Distribución de P. aeruginosa
La bacteria P. aeruginosa fue identi-
ficada por primera vez en 1882 en her-
idas cutáneas productoras de pus con
coloración azul-verdosa (Farías et al.,
2005). En la actualidad se conoce que la
distribución de la bacteria es muy
amplia, debido a la habilidad intrínseca
que posee para asimilar una gran var-
iedad de compuestos orgánicos como
fuente de nutrientes, además es capaz de
adaptarse a múltiples ambientes y
nichos ecológicos (Farías et al., 2005;
Soberón, 2003).
Se encuentra ampliamente distribui-
dos en la naturaleza; usualmente se le
detecta en reservorios de agua contam-
inada de fuentes animales y humanas,
por el cual es considerado un indicador
complementario a coliformes totales y
fecales en aguas; estando más asocia-do
en comparación con los coliformes en
residuos fecales humanos más que de
animales, en balones de agua des-tilada
y su presencia en reservarlos de agua
potable (Rahme et al., 1997). Se ha
demostrado que P. aeruginosa es capaz
de sobrevivir y multiplicarse en aguas
tratadas debido a que es capaz de re-
sistir los efectos del cloro residual por lo
que su presencia en el agua potable es
de alto riesgo para la salud y es in-
dicativo del deterioro de la calidad de la
misma (Marchand, 2002).
Al encontrarse presente también en
el ambiente intrahospitalario, esta car-
acterística la ha convertido en uno de
78 | Cátedra Villarreal | V. 4 | No. 1 | enero -junio | 2016 |
Patrones fenotípicos de resistencia en Pseudomonas aeruginosa de muestras clínicas a nivel de Sudamérica
los principales problemas de salud a
nivel mundial, en donde es uno de los
agentes causales de infecciones noso-
comiales de tipo oportunista de mayor
incidencia (Friedrich, Klauss-Dieter
& Burke, 2008; Soberón, 2003). Esto
ha generado que en la actualidad sea el
microorganismo aislado con may-or
frecuencia en pacientes que poseen
más de una semana de hospitalización
(Friedrich et al., 2008).La formación
de las biopelículas es una estrategia de
sobrevivencia de P. aeruginosa en me-
dios hostiles, el cual le confiere resis-
tencia frente a antibióticos y elementos
de respuesta inmune, encontrándose
principalmente en superficies inertes,
como los tubos endotraqueales, o en
te-jido necrótico, así como también en
los pulmones de los pacientes con
fibrosis quística (Giwercman, Jensen,
Høiby, Kharazmi & Costerton, 1991;
Soberón, 2003).
Patogénesis de P. aeruginosa
La patogénesis de P. aeruginosa ocurre
en tres etapas: La primera etapa es la
adhesión bacteriana y colonización, la
segunda etapa es invasión local, y por
último la diseminación y enfermedad
sistémica. Tras el establecimiento de la
infección, P. aeruginosa secreta exotox-
inas del tipo A y S conjuntamente con
enzimas hidrolíticas, compuestos que al
entrar en contacto con los tejidos de-
gradan las membranas celulares y las
destruyen progresivamente (Friedrich et
al., 2008).
Factores de virulencia de P.
aeruginosa (Koneman et al., 2008).
Alginato: Polisacárido capsular que
permite a las bacterias infectantes ad-
herirse a la superficie de las células y
formar biopelículas que, a su vez, pro-
tegen a las bacterias de los antibióticos
y del sistema inmune del huésped.
Pili: Apéndices de la superficie bac-
teriana que permiten su adherencia a
receptores de gangliósido GM-1
loca-lizados en la membrana de las
células epiteliales del huésped.
Neuraminidasa. Elimina los
residuos de ácido siálico de los
receptores gan-gliósido GM-1, lo
que facilita la unión de los pilis.
Lipopolisacárido: Exotoxina que
causa síndrome de sepsis.
Exotoxina A: Provoca destrucción ti-
sular, inhibición de la síntesis proteica;
interrumpe la actividad celular y la res-
puesta de los macrófagos.
Exoenzima S: Inhibe la síntesis
protei-ca.
Fosfolipasa C: Destruye la membrana
citoplasmática; desnaturaliza la sustan-
cia tensoactiva pulmonar; inactiva las
opsoninas.
Leucocidina: Inhibe la función de
neu-trófilos y linfocitos.
Piocianinas: Suprime a otras
bacterias e interrumpe la actividad
de los cilios respiratorios; produce
daño oxidativo de los tejidos.
Resistencia a los antibióticos:
Favorece la presencia de la bacteria
en los hospi-tales y en los pacientes.
Importancia clínica de
Pseudomonas aeruginosa
El género Pseudomonas consta de 76
especies, dentro de las cuales P. aerugi-
nosa es la más importante con respecto
al número y tipo de infecciones gene-
radas en humanos, principalmente en
infecciones intrahospitalarias. Sumado a
esta capacidad, se encuentra la emer-
gencia de cepas multirresistentes a la
mayoría de antibióticos convencionales
| Cátedra Villarreal | V. 4 | No. 1 | enero -junio | 2016 | 79
Carlos Bolaños, José Iannacone
(Castillo, Ribas, Carranza &
Aparicio, 2006).
Epidemiología
La bacteria P. aeruginosa produce in-
fección en heridas y quemaduras, for-
mando pus color azul verdoso (Farías et
al., 2005). Cuando se introduce al siste-
ma nervioso central causa meningitis,
cuando la vía de entrada son catéteres,
instrumentos o soluciones irritantes
ocasiona infección del aparato urinar-io.
La infección del aparato respiratorio, en
especial por ventiladores mecánicos
contaminados, producen neumonía ne-
crosante (Torres et al., 1990). En recién
nacidos o personas inmunocompro-
metidas, P. aeruginosa puede invadir el
torrente sanguíneo y causar septicemia.
En la mayor parte de las infecciones por
P. aeruginosa los síntomas y signos son
inespecíficos y se relacionan con el ór-
gano afectado (Brooks, Carrol, Butel,
Morse & Mietzner, 2005).
Las infecciones nosocomiales cau-
sadas por P. aeruginosa poseen altos
índices de prevalencia y mortalidad
especialmente tras la primera semana
de hospitalización (Farías et al., 2005,
Rotstein et al., 2008). Los índices de
mortalidad asociados a infecciones por
esta bacteria a nivel mundial alcanzan
valores alarmantes que llegan a ser de
45% para neumonías adquiridas duran-
te hospitalización, 60% para casos de
bacteriemias y hasta 69,7% para casos
de neumonía adquirida por el uso de
ventilador mecánico (Farías et al.,
2005, Rotstein et al., 2008).
Pseudomonas aeruginosa es uno de
los patógenos nosocomiales más fre-
cuentes, causante de infecciones sev-
eras, particularmente en pacientes con
cáncer, quemaduras y fibrosis quística
(Bouza et al., 2003). Su tratamiento es
complicado debido a que esta bacte-
ria tiene la capacidad de adaptación,
mutación y adquisición de genes de
resistencia; los cuales le confieren re-
sistencia hacia los betalactámicos an-ti-
pseudomonas, siendo de mayor tras-
cendencia clínica la resistencia hacia los
carbapenémicos (Crespo, Woodford,
Sinclair, Kaufmann & Turon, 2004).
Mecanismos de resistencia en P.
aeru-ginosa
La resistencia bacteriana a los antimi-
crobianos es uno de los serios prob-
lemas en la terapia de las enfermedades
infecciosas y en la práctica epidemi-
ológica. Ninguna sustancia antimicro-
biana actúa sin el riesgo futuro de que
los microorganismos desarrollen resis-
tencia (Stuart & Levy, 1998).
Resistencia natural
Pseudomonas aeruginosa se caracter-
iza por expresar una resistencia natu-
ral, intrínseca, a diversos antibióticos
sin relación estructural, esto se debe
principalmente a una escasa permeab-
ilidad de la membrana externa, presen-
cia de una betalactamasa cromosómica
inducible tipo AMPC y la expresión
constitutiva de diversos sistemas de
expulsión activa, la participación con-
junta de estos tres factores condiciona
resistencia natural a la penicilina, ami-
nopenicilinas, cefalosporinas de prim-
era y segunda generación, cefotaxima,
ceftriaxona, cefalosporinas de tercera
generación orales, cloranfenicol, nitro-
furantoína, sulfonamidas, trimetropim,
tetraciclina, novobiocina y ácido na-
lidíxico (Gibb et al., 2002; Lauretti et
al., 1999).
Resistencia adquirida
Diversos mecanismos pueden con-
tribuir para adquirir resistencia a beta-
lactámicos en P. aeruginosa, incluyendo
la producción de betalactamasas, la so-
80 | Cátedra Villarreal | V. 4 | No. 1 | enero -junio | 2016 |
Patrones fenotípicos de resistencia en Pseudomonas aeruginosa de muestras clínicas a nivel de Sudamérica
bre-regulación de sistemas de eflujo, y
una disminución de la permeabilidad de
la membrana externa (Livermore, 2002).
La adquisición de elementos genéticos
móviles que codifican para β-lactamasas
de espectro extendido (BLEE), tales
como serino β-lactamasas de clase A y
D de Ambler y las meta-lo-β-lactamasas
(MBL) de clase B de Ambler, son
importantes mecanismos involucrados
en la resistencia en P. aeruginosa
(Gómez et al., 2005).
Las cepas de P. aeruginosa se aíslan
con frecuencia en pacientes sometidos
a tratamientos antimicrobianos prolon-
gados, el cual favorece la adaptación al
antimicrobiano y el surgimiento de la
multirresistencia bacteriana (Asboe et
al., 1998).
Betalactamasas
Las betalactamasas son enzimas con
capacidad de hidrolizar el enlace amida
del anillo β-lactámico el cual confiere
resistencia a la bacteria y esta es capaz de
inactivar a diversos antibióticos como: las
cefalosporinas, monobactámicos,
carbapenemicos, impidiendo su acción
antimicrobiana en la inhibición de la
síntesis del peptidoglucano (Abarca &
Herrera, 2001). Estas enzimas se en-
cuentran codificadas en plásmidos lo que
les otorga la capacidad de disem-inación
entre distintas cepas lo que ha provocado
que se hayan difundido a nivel mundial en
pocos años (Bush & Jacoby, 2010).
Ambler clasificó las β-lactamasas acorde
a su estructura molecular en cuatro ti-
pos (A a la D). La clase A, C y D son las
más comunes; la clase B se diferencian
por la producción de metalobetalact-
amasas. Los genes que codifican dicha
resistencia son localizados en el cromo-
soma bacteriano, los cuales son acarrea-
dos por transpones o están presentes en
algunos integrones. Los genes pueden
ser identificados en todas las Entero-
bacterias, pero en cepas con resistencia
a betalactámicos como E. coli, Klebsi-
ella sp.y Proteus sp. adquieren mayor
importancia identificar β-lactamasas de
clase A, C y D, y en Acinetobacter sp
y Pseudomonas sp. las betalactamasas
de clase B (Jacoby & Muñoz, 2005).
Pseudomonas aeruginosa posee β-
lactamasas tipo AMPC de origen cro-
mosómico, la misma que al sobreexpre-
sarse gracias a un mecanismo comple-jo
de interacción y mutación de varios
genes, otorga a esta bacteria resistencia
frente a la mayoría de antibióticos β-lac-
támicos (Langaee, Gagnon & Huletsky,
2000). Lasβ-lactamasas tipo BLEE,
codificadas por plásmidos se adquieren
mediante transporte de ADN extracro-
mosomal y se manifiestan también por
resistencia a penicilinas y a cefalospo-
rinas y por ultimo enzimas llamadas
carbapenemasas las cuales causan re-
sistencia a carbapenémicos (Gómez et
al., 2005).
Tipos de betalactamasas
Betalactamasa AMPC
Son capaces de hidrolizan cefalospori-
nas de primera y segunda generación,
incluidas las cefamicinas y en menor
medida las de tercera generación,
mientras que generalmente son muy
poco eficaces hidrolizando las cefalo-
sporinas de cuarta generación y los car-
bapenémicos (Langaee et al., 2000).
El espectro de hidrólisis puede ampli-
arse y afectar además a cefalosporinas
de cuarta generación (AMPC de espec-
tro extendido), pero se desconoce cuál
es la prevalencia y la relevancia clíni-ca
y epidemiológica de estas variantes de
AMPC. La cloxacilina y el aztreo-nam,
así como el ácido borónico y sus
derivados (ácido fenilborónico), inhi-
ben a las betalactamasas de tipo AMPC,
| Cátedra Villarreal | V. 4 | No. 1 | enero -junio | 2016 | 81
Carlos Bolaños, José Iannacone
mientras que el ácido clavulánico,
sul-bactam y tazobactam no son
buenos in-hibidores (Basak, Khode,
Bose & Mal-lick, 2009; Black,
Moland & Thomson, 2005).
Pseudomonas aeruginosa posee AMPC
cromosómicas inducibles el cual se
produce a bajos niveles de manera nat-
ural y aumentan su síntesis en presencia
de inductores betalactámicos. Las beta-
lactamasas de tipo AMPC plasmídicas
pueden causar fracasos terapéuticos,
similares a los descritos en infecciones
causadas por aislados hiperproductores
de AMPC cromosómica inducible (se-
lección de mutantes con desrepresión
estable) en tratamientos con betalac-
támicos (Thomson, 2010).
Sin embargo, la desrepresión de
AMPC en P. aeruginosa es un
fenómeno más complejo que el que tiene
lugar en las especies de enterobacterias
que poseen esta enzima y el fenotipo de
desrepresión puede ser parcial para
evolucionar posteriormente a completo o
total (Black et al., 2005). Cuando la
producción de AMPC esta aumentada de
forma significativa, P. aeruginosa
expresa resistencia a todos los
antibióticos betalactámicos con la
excepción de los carbapenémicos (Kong
et al. 2005). A diferencia de lo que
ocurre con los miembros de la familia
Enterobacteriaceae, la desrepresión de
AMPC (AMPCd) en P. aeruginosa
también afecta a cefepime (Langaee et
al., 2000).
Betalactamasa de expectro
extendido (BLEE)
Las betalactamasas de espectro
extendido tienen capacidad de
hidrolizar y causar resistencia o
sensibilidad disminuida a penicilinas,
oximinocefalosporinas (cefotaxima,
ceftriaxona, ceftazidima, cefepime)
y monobactámicos (aztreonam), pero
no a cefamicinas (cefoxitina) ni
carbapenémicos (imipenem,
meropenem y ertapenem), siendo
inhibidas por el ácido clavulánico
(Paterson & Bonomo, 2005). Estas
betalactamasas pertenecen a la clase
molecular A de Ambler y entre ellas se
encuentran las de tipo TEM y SHV
(derivadas de enzimas con menor
espectro de hidrólisis), la familia
CTX-M (procedente de betalactamasas
cromosómicas del género Kluyvera), y
otras menos prevalentes como PER,
VEB, BES, GES, TLA y SFO (Pagani
et al., 2004).
La BLEE tipo GES-1 se identificó por
primera vez en una cepa de K.
pneumoniae en la Guayana Francesa en el
año 1998 y, subsecuentemente, en Francia
(Castanheira, Troillet, Eliopoulos &
Samore, 2004). Los genes blaGES se
encuentran mayormente como “cassettes”
genéticos insertados dentro de integrones
clase 16,8. Hasta abril de 2006, cuatro
tipos de GES (GES-1,-2,-8 y -9) habían
sido detectadas en P. aeruginosa y,
recientemente, en China se reportó el
descubrimiento de GES-5 en un aislado
de P. aeruginosa CAZ resistente (Wang,
Cai, Chang & Zuhuang, 2006). Las
enzimas de la familia GES hidrolizan
principalmente CAZ y son susceptibles de
inhibir por IMI. Su presencia disminuye
notablemente las opciones terapéuticas,
por ello es indispensable su detección
(Aránzazu, Coque & Cantón, 2006).
Carbapenemasas
Son enzimas que tienen la habilidad
de hidrolizar carbapenémicos y en su
gran mayoría hidrolizan casi todos
los betalactámicos de uso clínico. Se
clasifican en dos grandes grupos de
acuerdo al mecanismo hidrolítico de
su sitio activo, el primer grupo
82 | Cátedra Villarreal | V. 4 | No. 1 | enero -junio | 2016 |
Patrones fenotípicos de resistencia en Pseudomonas aeruginosa de muestras clínicas a nivel de Sudamérica
son las carbapenemasas que poseen
serina, en este grupo encontramos las
carbapenemasas clase A y clase D
(Oxacilinasas). El segundo grupo son
las carbapenemasas
metalobetalactamasas (MBL) las
cuales necesitan átomos de zinc; que
es utilizado como metal cofactor para
su actividad enzimática, también son
conocidas como carbapenemasas
clase B (Queenan & Bush, 2007).
Carbapenemasas Clase A
Son inhibidas débilmente por el ácido
clavulánicoperonoporelEDTA,además
son dependientes de serina, incluye las
no metalocarbaenemasas (Bush, Jacoby
& Medeiros, 1995). Son capaces de
hidrolizar los carbapenems, así como las
cefalosporinas, penicilinas y aztreonam,
adicionalmente son inhibidas por
el clavulánico y tazobactam (Pitout
& Laupland, 2008). Estas enzimas
carbapenemasas han sido identificadas
principalmente en Enterobacter
cloacae, Serratia marcescens y K.
pneumoniae, aunque también se han
detectado en no fermentadores como P.
aeruginosa (Drawz & Bonomo, 2010).
La enzima SME-1 fue detectada
inicialmente en Inglaterra en un
aislamiento de S. marcescens en 1982.
La enzima IMI-1 y NMC fueron
detectadas en E. cloacae; los genes para
estas tres enzimas están localizados en
el cromosoma. Sin embargo la enzima
IMI-2 ha sido encontrada en plásmidos
en especies de Enterobacter (Drawz
& Bonomo, 2010). Las primeras
enzimas tipo KPC fueron
encontradas en plásmidos, son
predominantes en K. pneumoniae
en A. baumannii y P. aeruginosa en
este último microorganismo la
enzima KPC ha sido detectada tanto
en plásmido como en cromosoma
(Nordmann, Cuzon & Naas, 2009).
Carbapenemasas de clase B
Conocidas como metalobetalactamasas
(MBL), son el grupo más relevante de
carbapenemasas, tanto por
diversificación en diferentes variantes
aminoacídicas como por su
diseminación prácticamente mundial;
las cuales se caracterizan por
hidrolizar los carbapenems y los
inhibidores de β-lactámicos como
ácido clavulánico y tazobactam, pero
susceptibles a la inhibición por
agentes quelantes como EDTA (ácido
etilendiaminotetraacético) ácido
mercaptoacético y el MPA(ácido
mercaptopropiónico) (Sánchez,
Salso, Culebras & Picazo, 2004).
El mecanismo de hidrólisis depende de
la interacción de los β-lactámicos con
iones de zinc presentes en el sitio
activo de la enzima, por lo cual estas
enzimas únicamente son inhibidas por
quelantes de iones metálicos (Drawz &
Bonomo, 2010). De las MBL
transmisibles se han reportado enzimas
de las familias VIM, IMP, GIM, SIM,
SPM y la más reciente es la enzima
AIM-1; las familias con más variantes
son las familias IMP y VIM, las cuales
han sido reportadas en gram negativos
tanto fermentadores como no
fermentadores (Livermore, 2000).
Detección de los patrones fenotípicos
de resistencia en P. aeruginosa.
La detección rápida de la resistencia a
los antimicrobianos así como su
caracterización es una prioridad en los
laboratorios de microbiología clínica.
Su conocimiento ayuda en la elección
del antibiótico más adecuado para el
tratamiento de la infección y permite
instaurar las medidas adecuadas de
aislamiento para evitar la dispersión
del microorganismo a otros pacientes.
| Cátedra Villarreal | V. 4 | No. 1 | enero -junio | 2016 | 83
Carlos Bolaños, José Iannacone
Detección del patrón fenotípico AMPC
Método de aproximación de discos: Es
aplicable a betalactamasas AMPC
inducibles. La técnica consiste en realizar
un antibiograma convencional, para luego
colocar un disco de cefoxitina o cualquier
otro antimicrobiano inductor (tabla 1) a
una distancia de
Tabla 1
27mm centro-centro de un disco de
ceftazidima, ceftriaxona o cefotaxima
(antimicrobiano sustrato, revelador o
testigo). El microorganismo producirá
una betalactamasa inducible si se
observa un halo de inhibición truncado
del antimicrobiano sustrato, testigo o
revelador (Sanders & Sanders, 1979).
Antimicrobianos inductores de la síntesis de betalactamasas (Jacoby 2009)
Antimicrobianos con acción
Antimicrobianos con acción
inductora elevada
inductora débil
Benzil y aminopenicilinas
Ureidopenicilinas
Ácido clavulánico
Cefalosporinas de 3
ra
generación
Cefalosporina de 1° generación
Cefalosporinas de 4
ta
generación
Cefoxitina
Aztreonam
Imipenem
Detección del patrón fenotípico BLEE
var sinergia entre los discos de imipen-
En una placa de agar MH inoculada
em-ceftazidima (Pasteran et al., 2004).
Detección del patrón fenotípico KPC
con una suspensión de la cepa en es-
tudio ajustada al 0,50 en la escala Mc-
En una placa de agar MH inoculada con
Farland. A) En el método doble disco
difusión, se usa el disco de amoxicilina/
una suspensión de la cepa en estudio
ácido clavulánico (30μg) en el centro de
ajustada al 0,50 en la escala McFarland.
una placa de Petri, y alrededor de este se
Se debe observar el halo de ceftazidi-
colocaron discos de ceftazidima (30μg),
ma (30μg) para P. aeruginosa, el cual
ceftriaxona (30μg), cefotaxima (30μg), y
debe ser resistente o intermedio. Luego
aztreonam (30μg) a 20 mm de distancia
observar el halo de inhibición de imi-
del disco central. La presencia de BLEE
penem que debe ser igual a seis mm Al
se manifiesta por el efecto sinérgico del
enfrentar los discos imipenem - EDTA/
inhibidor. B) Método de discos combi-
SMA meropenem no se debe eviden-
nados, enfrenta el disco de ceftazidima
ciar sinergia. El halo de inhibición de
con ceftazidima clavulanico, un incre-
aztreonam (30μg) debe ser igual a seis
mento mayor a 5 mm de ceftazidima/
mm. El método microbiológico confir-
ceftazidima clavulanico se le considera
matorio de actividad enzimática MA-
positivo (Subcomisión de antimicro-
SUDA, es con los discos de imipenem
bianos de la sociedad argentina, bac-
(10μg) y meropenem (10μg)
deben
teriología, micológica y parasitología
debe resultar positivo (Pasteran
et al.,
clínica [SADEBAC], 2006). Método
2011; SADEBAC, 2006).
doble disco difusión para BLEE-ges,
Detección del patrón fenotípico MBL
se debe sospechar BLEE con halos de
ceftazidima menor que 18 mm y obser-
En una placa de agar MH inoculada con
84 | Cátedra Villarreal | V. 4 | No. 1 | enero -junio | 2016 |
Patrones fenotípicos de resistencia en Pseudomonas aeruginosa de muestras clínicas a nivel de Sudamérica
una suspensión de la cepa en estudio
ajustada al 0,50 en la escala McFarland.
(A) Método de doble disco, consiste en
colocar un disco que contiene un agen-
te quelante (EDTA, SMA, ácido dipi-
colínico o ácido 2-mercaptopropióni-co)
rodeado por un disco de imipenem
(10μg) y otro de meropenem (10μg).
Esta prueba es positiva (presencia de
MBL) si se observa un aumento del halo
de inhibición o la presencia de una zona
de inhibición entre el imipenem y/o el
meropenem y el agente quelante (Pas-
teran et al., 2004). (B) Método de discos
combinados, consiste en colocar discos
de imipenem y meropenem suplemen-
tados con sustancias quelantes y discos
de imipenem y meropenem solos, con-
siderándose una prueba positiva si se
observa un aumento del halo mayor a 5
mm de inhibición de los discos suple-
mentados en comparación con los ha-los
producidos alrededor de los discos que
contienen antibiótico solo (Pérez et al.,
2008). (C) Método E-test de imi-
penem/imipenem+EDTA: consiste en
colocar una tira de e-test en una placa de
Mueller-Hinton inoculada con una
dilución de 0,5 en la escala de McFar-
land. Incubamos a 37 durante 24 h. Se
considera la presencia de metalobeta-
lactamasas cuando CIM imipenem/ CIM
imipenem-EDTA debe ser mayor o igual
a 8 (Bustamante & Brevis, 2010).
Luego de la búsqueda realizada en las
diversas revistas y tesis de los diferentes
países de Sudamérica se encontraron un
total de 21 trabajos de investigación para
el análisis de los patrones feno-típicos
en P. aeruginosa siendo estos: AMPCd,
BLEE, KPC, MBL (Figura 1).
Figura 1. Porcentaje de los estudios encontrados en los diferentes países para P. aeruginosa n=21
| Cátedra Villarreal | V. 4 | No. 1 | enero -junio | 2016 | 85
Carlos Bolaños, José Iannacone
Tabla 2
Lista de los principales autores de los diferentes países para la evaluación de
los patrones fenotípicos de resistencia en P. aeruginos
PATRONES
FENOTÍPICOS
ARGENTINA
BRASIL
CHILE
COLOMBIA
VENEZUELA
PERÚ
AMPC d
Ferrero et al . (2009)
Morales et al. (2008)
n=89
P=5,3%
n=59 P=3,3%
BLEE
Ferrero et al . (2009)
Pellegrino et al. (2006)
Bustamante & Brevis
Martínez et al. (2003)
Marchan et al . (2012)
n=89
P=8,9%
n=25 P=16%
et al . (2010)
n=58 P=38%
n=26 P=0%
n=30 P=16,7%
Morales et al. (2008)
Tovar et al . (2008)
n=59 P=6,8%
n=66 P=25,8%
Pasteran et al. (2009)
KPC
n=514
P=12,6%
Morales et al. (2008)
n=59 P=*
Saavedra et al. (2014)
n=57 P=15,8%
Pagniez et al. (2006)
Marra et al. (2006)
Pérez et al. (2008)
Morales et al. (2008)
Marchan et al . (2012)
Díaz (2008)
n=91
P=11%
n=76 P=30,3%
n=59 P=83,1%
n=59 P=*
n=26 P=7,7%
n=186 P=7,6%
Cejas et al. (2008)
Gaspereto et al. (2007)
Saavedra et al. (2014)
Tovar et al . (2008)
MBL
n=129 P=14%
n=60 P=81.7%
n=57 P=57,9%
n=66 P=10,6%
Ferrero et al. (2009)
Scheffer et al. (2010)
Nuñez et al . (2009)
n=86
P=17,4 %
n=29 P=20,7%
n=487 P=12,3%
Gómez et al. (2010)
Perozo et al . (2012)
n=69 P=76,8%
n=726 P=19%
Magalhães et al. (2005)
n=48 P=31,2%
n: Numero total de cepas analizadas
p: Prevalencia del patron fenotípico de resistencia
*No se diferenció a las carbapenemasas Ptotal = 3,4%
En los países de Argentina y Colombia
se encontraron los cuatro patrones fe-
notípicos de resistencia de P. aeruginosa
AMPC, BLEE, KPC, MBL de los cuales
Ferrero et al. (2009) y Morales, Baleta,
Camargo y Correa (2008) respectiva-
mente para su país, fueron los únicos
autores que encontraron y analizaron los
cuatro patrones fenotípicos men-
cionados anteriormente. Para los países
de Brasil, Chile y Venezuela se encon-
traron para el análisis los patrones fe-
notípicos BLEE y MBL. En el Perú
las MBL fue el único patrón
fenotípico de resistencia encontrado
para el análisis (Tabla 2).
En cuanto a la prevalencia de los pa-
trones fenotípicos de resistencia en Pseu-
domonas aeruginosa para Sudamérica se
encontro el siguiente orden de mayor a
menor: MBL(2225), BLEE(330).
KPC(630), AMPCd(145), donde n=nú-
mero total de cepas analizadas (Figura 2).
Figura 2. Prevalencia de los patrones fenotípicos de resistencia en P.
aeruginosa a nivel de Sudamérica
86 | Cátedra Villarreal | V. 4 | No. 1 | enero -junio | 2016 |
Patrones fenotípicos de resistencia en Pseudomonas aeruginosa de muestras clínicas a nivel de Sudamérica
Al dividir el análisis por periodos de
tiempo se observó lo siguiente: para el
periodo 2003-2006 la prevalencia de los
patrones fenotípicos de resistencia en P.
aeruginosa fueron para BLEE (n=83)
mayor que MBL (n=215). En el periodo
2007-2010 la prevalencia de los patro-
nes fenotípicos de P. aeruginosa fueron
de mayor a menor en el siguiente orden:
BLEE (n=247), MBL (n=1171), KPC
(n=514) y por ultimo AMPCd (n=145).
Para el periodo 2011-2014 la prevalencia
de los patrones fenotípicos de P. aerugi-
nosa fueron para MBL (n=809) mayor
que KPC (n=57), donde n=número to-tal
de cepas analizadas (Figura 3). Ade-más
de los 21 trabajos encontrados en el
análisis para el primer periodo 2003-2006
le corresponde el 23.8% de traba-jos
encontrados, en el segundo periodo 2007-
2010 se encontró 61.9% y en el úl-timo
periodo 2011-2014 fue de 14.3%.
Figura 3. Prevalencia de los patrones fenotípicos de resistencia en P.
aeruginosa a nivel de Sudamérica a través del tiempo
Tabla 3
Métodos utilizados para la detección de los patrones fenotípicos de
resistencia en P. aeruginosa
PATRONES
ARGENTINA
BRASIL
CHILE
COLOMBIA
VENEZUELA
PERÚ
FENOTÍPICOS
AMPC d
N.I
N.I
MÉTODO DISCOS COMBINADOS
CAZ-CAZ/AC
MÉTODO DE DOBLE DISCO
BLEE
MÉTODO DE DOBLE DISCO
MÉTODO DISCOS COMBINADOS
MÉTODO DE DOBLE DISCO
MÉTODO DISCOS COMBINADOS
CAZ-AMC-ATM
IMI-CAZ
CAZ-CAZ/IMI
CTX
CAZ-CAZ/AC
FEP
CAZ-AMC-CRO
ATM
ALGORITMO KPC
ALGORITMO KPC
KPC
IMI-EDTA-MER
(NEGATIVO)
IMI-EDTA-MER (NEGATIVO)
ATM (RESISTENTE)
ATM (RESISTENTE)
MÉTODO E-TEST
MÉTODO DE DOBLE DISCO
IMI-EDTA/SMA-MER
MÉTODO DISCOS COMBINADOS
IMI-EDTA-MRP
B
M
MÉTODO DOBLE DISCO
IMI-IMI/EDTA
MÉTODO E-TEST
MÉTODO DE DOBLE DISCO
MÉTODO DOBLE DISCO
MBL
IMI-EDTA-MER
IMI-EDTA/SMA-MER
E-TEST
IMI-EDTA-MER
CAZ
MÉTODO DE DOBLE DISCO
IMI-EDTA
MÉTODO DISCOS COMBINADOS
CAZ-MPA
IMI-IMI/EDTA
MER-MER/EDTA
CAZ: Ceftazidima
CTX: Cefotaxima
CRO: Ceftriaxona
FEP: Cefepime
ATM: Aztreonam
IMI: Imipenem
MER: Meropenem
AMC: Amoxicilina + ácido clavulánico
N.I: No se indicó
CAZ/AC: Ceftazidima + Ácido clavulánico
EDTA: Ácido etilendiaminotetraacético
MPA: Ácido mercaptopropionico
EDTA/SAM: Ácido etilendiaminotetraacético + Ácido tioglicólico
IMI/EDTA: Imipenem + Ácido etilendiaminotetraacetico
MER/EDTA: Meropenem + Ácido etilendiaminotetraacetico
| Cátedra Villarreal | V. 4 | No. 1 | enero -junio | 2016 | 87
Carlos Bolaños, José Iannacone
En la detección de los patrones
fenotípicosderesistenciadeP.aeruginosa
para la detección BLEE se utilizaron el
método de discos combinados (CAZ-
CAZ/AC), el método sinergia de doble
disco (AMC-CAZ-CTR-CTX-ATM) o
(IMI-CAZ).Para la detección de KPC se
siguió el algoritmo de KPC de P.
aeruginosa. En la detección de MBL se
emplearon el método sinérgico doble
disco (principalmente IMI-EDTA-MER,
IMI-EDTA/SAM-MER, CAZ-MPA), el
método de discos combinados
(principalmente IMI-IMI/EDTA) y el
método E-test (Tabla 3).
Resumen de las investigaciones de
los patrones fenotípicos de
resistencia en P. aeruginosa en
seis países de Sudamérica
En Argentina: Encontraron
91 aislamientos de P. aeruginosa
provenientes de pacientes internados en
distintas salas del Hospital de Clínicas
“José de San Martín”, el criterio de
selección de los microorganismos fue la
resistencia a MER y /o IMI, resultando
11,1% con el patrón fenotípico MBL,
utilizando para su detección discos IMI
(10μg), MER (10μg), CAZ (30μg)
alrededor del disco de EDTA (1μmol).
(Pagniez et al., 2006). En otro estudio de
129 aislamientos de P. aeruginosa
recuperados de pacientes internados en
diferentes servicios del Hospital “Eva
Perón” de la Provincia de Buenos Aires,
el 14% de cepas presentó el patrón
fenotipo de resistencia MLB, utilizando
los discos de CAZ(30μg) y IMI(10μg)
alrededor del disco EDTA de un 1μmol
(Cejas et al., 2008).
En 86 cepas aisladas de P. aeruginosa
intrahospitalarias del Hospital Escuela
“José de San Martín” de Corrientes, para
el estudio de los patrones fenotípicos
usando los criterios de SEDABEC, de
obtuvieron 17,4% como productor de
MLB, mientras el 5,8% de las cepas
fueron productores de BLEE y el
3.4% de las cepas resultó productor
de AMPCd. (Ferrero et al., 2009).
Durante un estudio se recuperaron seis
cepas de P. aeruginosa provenientes de
pacientes hospitalizados de un centro
privado de Córdoba, el 66% fue productor
BLEE, detectadas con la sinergia de
discos entre CAZ (30μg) e IMI (10μg)
(Piersigilli et al., 2009). En un estudio
realizado de nueve hospitales de
Argentina se recolectaron 514 cepas de P.
aeruginosa de las cuales el 12% presento
el fenotipo carbapenemasa tipo KPC al
presentar resistentencia al ATM y no
haber sinergia entre los discos
carbapenems y el disco de EDTA
(Pasteran et al., 2012).
En Brasil: Se aislaron 48 cepas de P.
aeruginosa resistentes a imipenem a
partir de muestras de orina, esputo,
sangre, aspirado traqueal, aspirado
bronquio alveolar, resultando el 31,2 %
cepas productoras de MBL, detectados
por el método de sinergia de doble disco
usando 2-MPA y CAZ (30μg) y el
método de discos combinados de IMI
(10μg) con y sin EDTA (750μg)
(Magalhães, Lins & Magalhães, 2005).
En un estudio realizado en 76 cepas de
P. aeruginosa aisladas de hemocultivos,
la producción de fenotipos MLB fue
30,3%, usando discos IMI (10μg)-
EDTA-MER (10μg) para su detección;
se utilizó como método alternativo el
disco 2-MPA, pero obtuvo baja
sensibilidad (Marra et al., 2006). En un
análisis realizado en un hospital público
en Río de Janeiro de 25 cepas de P.
aeruginosa, el 16% de cepas presentaba
fenotipo BLEE, detectadas con el efecto
sinérgico de los discos CAZ (30μg) y
CAZ/IMP (30μg/0,1μg) (Pellegrino,
Netto-dos Santos, Riley & Moreira,
2006).
88 | Cátedra Villarreal | V. 4 | No. 1 | enero -junio | 2016 |
Patrones fenotípicos de resistencia en Pseudomonas aeruginosa de muestras clínicas a nivel de Sudamérica
En otro estudio posterior
identificaron 60 cepas de P. aeruginosa
procedentes de tres hospitales
universitarios de la ciudad de Porto
Alegre, donde el 81,7% de las cepas
presentó MBL, usando disco 2-MPA
para su detección (Gaspareto, Martins,
Zavascki & Barth, 2007). Encontraron
29 cepas de P. aeruginosa carbapenems
resistentes, aisladas a partir del tracto
urinario, tracto respiratorio,
hemocultivo, entre otros. Los métodos
para la detección de cepas MBL fueron:
Sinergia de doble disco, usando 2-MPA
y CAZ (30μg) resultando 20,7% de
cepas productoras de MBL y el método
de disco combinado, usando discos de
IMI (10μg) con y sin EDTA (930μg)
obteniendo 24,1% de cepas productores
MBL (Scheffer et al., 2007). En un
hospital universitario de Brasil se
aislaron 69 cepas de P. aeruginosa
resistentes a imipenem aisladas de
sangre, la detección de cepas con
fenotipo MBL realizadas con E-test
resultaron positivas en 76,8 % de las
cepas de P. aeruginosa, confirmadas en
30,4% de las cepas aisladas productoras
de MBL por PCR (Gómez et al. 2010).
En Chile: El laboratorio de
microbiología del Hospital Clínico de
la Universidad Católica de Chile,
realizó una investigación a 59 cepas de
P. aeruginosa obtenidas a partir de
muestras de aspirados endotraqueales,
lavado bronquioloalvolar, hemocultivos,
punta de catéter y urocultivos, de las
cuales resultaron que el 83,1% de las
cepas fueron positivas para MBL por E-
test, donde la relación CIM
imipenem/CIM imipenem-EDTA fue
mayor o igual a ocho veces (Pérez et al.,
2008). Investigaron 30 cepas de P.
aeruginosa del Hospital de Talca y el
Hospital Clínico Herminda Martín de
Chillán, el 16,7% de las cepas era
productor de BLEE, la sinergia de
doble disco se usó para la detección de
BLEE (Bustamante & Brevis, 2010).
En Colombia: Identificaron
58
cepas de P. aeruginosa, en el Hospital San
Jerónimo, Monteria, donde el 38% de las
cepas fue productor de BLEE (Martínez et
al., 2003). En otro estudio se encontraron
59 cepas P. aeruginosa en un Hospital
público de la ciudad de Valledupar,
obteniendo un total de 6,8% de cepas con
fenotipo BLEE, 3,4% cepas con fenotipo
AMPC y cepas productoras de
carbapenemasas 3,4% (Morales et al.,
2008). De 57 aislamientos sospechosos de
ser productores de carbapenemasas, se
identificó en el 57,9% de las cepas
productoras de MBL y cepas productoras
de KPC fue 15,8%; además se encontró
una cepa con ambos fenotipos descrito.
Para la detección de MBL se utilizó discos
EDTA-SMA y el E-test; mientras para la
detección de cepas KPC se utilizó el
algoritmo KPC para P. aeruginosa
(Saavedra, Duarte, González & Realpe,
2104).
En Venezuela: Se estudiaron un total
de 66 cepas de P. aeruginosa
provenientes del Servicio Autónomo
“Hospital Antonio Patricio de Alcalá” y
del Laboratorio Clínico Universitario, la
presencia de cepas de P. aeruginosa con
fenotipo BLEE fue 25,8% y para MBL
10,6%.La determinación de BLEE y
MBL se realizó mediante el método
doble disco difusión teniendo como
antibiótico principal a los discos de
AMC y el EDTA respectivamente
(Tovar, 2008). Analizaron 487 cepas de
P. aeruginosa en el Centro de
Referencia Bacteriológica SAHUM
a todas las cepas resistentes a imipenem
o meropenem, se detectaron
fenotípicamente la producción de MBL
en 12,3% de las cepas de P. aeruginosa;
a través de los diferentes métodos como
Hodge modificado, sinergia de discos
| Cátedra Villarreal | V. 4 | No. 1 | enero -junio | 2016 | 89
Carlos Bolaños, José Iannacone
con EDTA, disco combinado y E-
test (Núñez, 2009).
En otro estudio 26 cepas P. aeruginosa
aisladas del Hospital Universitario
“Antonio Patricio de Alcalá” fueron
evaluados para la producción de BLEE y
MBL determinadas por pruebas de
sinergia de doble disco y el método del
disco combinado EDTA-imipenem
(10μg/10μg) respectivamente. Ninguna de
las cepas en estudio expresó la producción
de BLEE, mientras que 7,69% cepas
mostró fenotípicamente la producción de
MBL (Marchán, 2012). En un análisis de
726 cepas de P. aeruginosa el 20% fueron
resistententes a imipenem y meropenem,
resultando el 19% de las cepas
productoras de MBL, las cuales fueron
detectadas por el método de doble disco
entre discos EDTA/SAM (750/300μg) y
discos carbapenemicos; además realizaron
el método de Hodge modificado (Perozo,
Castellano, Ling & Arraiz, 2012).
En Perú: En 186 cepas de P.
aeruginosa identificadas en el Hospital
Nacional Guillermo Almenara Irigoyen,
las cuales fueron rehabilitadas al
encontrarse en agar soya tripticasa, el
7% de las cepas presentó el patrón
fenotípico MBL (Díaz, 2008).
DISCUSIÓN
En los 10 países de Sudamérica durante
el año 2003 hasta octubre del 2014, la
mayor cantidad de trabajos encontrados
para los patrones fenotípicos de
resistencia en P. aeruginosa a nivel de
Sudamérica corresponde a los países de
Brasil con 28,6%, Argentina con 23,8%
y Venezuela con 19% de los estudios
analizados. Esto se debe que en estos
países se han implementado protocolos
en la detección de los diferentes
patrones fenotípicos de resistencia en P.
aeruginosa los cuales son AMPCd,
BLEE, KPC, MBL evaluados en el
análisis (SADEBAC, 2006). Luego le
siguen los países de Colombia con
14,3%, Chile 9,5% y Perú con 4,8%.
Esto se podría deber a que en estos
países se encuentra en un proceso de
capacitación para la detección de los
patrones fenotípicos de resistencia en
P. aeruginosa presentando un número
limitado de datos el cual se corrobora
con los escasos trabajos encontrados
para el análisis. Lo que podría explicar
por qué en los países de Uruguay,
Ecuador, Paraguay y Bolivia no se
encontraron estudios para el análisis.
De los cuatro patrones fenotípicos de
P. aeruginosa encontrados en
Sudamérica, los patrones fenotípicos
con mayor prevalencia fueron para
MBL con 21,9% seguidamente de
BLEE con 18,5%. En los diversos
estudios a nivel mundial se observa el
predominio de las MBL sobre BLEE.
En África, se encontró la prevalencia de
MBL con 31% y BLEE con 27,5%
(Rehab et al., 2013) . En Asia, se
encontró la prevalencia MBL en 38% y
BLEE en 18% (Vahdani et al., 2012).
La mayor prevalencia del patrón
fenotípico MBL sobre las BLEE se debe
al incremento a nivel mundial de la
resistencia a los carbapenémicos (Pitout
& Laupland, 2008; Rodríguez 2009).
Durante los periodos de años 2003-
2006, 2007-2010, 2011-2014 los diversos
patrones fenotípicos de resistencia en P.
aeruginosa para Sudamérica se encontró
lo siguiente: para AMPCd en el único
periodo encontrado fue durante los años
2007-2010 con 3,4%, la poca cantidad de
cepas encontradas con este patrón
fenotípico se debe que solo fueron AMPC
desreprimido, mas no la AMPC
cromosómica inducible propia de la
bacteria. Para BLEE en el primer periodo
durante los años 2003-
90 | Cátedra Villarreal | V. 4 | No. 1 | enero -junio | 2016 |
Patrones fenotípicos de resistencia en Pseudomonas aeruginosa de muestras clínicas a nivel de Sudamérica
2006 se encontró 31,3% superior a lo
encontrado en el segundo periodo
durante los años 2007-2010 con
14,1%, además fue el patrón
fenotípico que alcanzo mayor
prevalencia durante los tres periodos.
Esto puede ser debido a que en un
inicio no se contó con un protocolo
estandarizado para la detección de
los otros patrones fenotípicos como
MBL y KPC (SEDABEC, 2006).
En otras parte de mundo como en
Asia, se han reportado BLEE 9,2%,
28%, 13,3% (Kalantar et al., 2012;
Moniri & Tavajjohi, 2011; Saeide,
Alavi-Naini & Shayan, 2013),
respectivamente. África, se encontró
BLEE 9,3%, 22%, 27,5% (Aibinu et al.,
2007; Olukemi & Abba, 2012; Rehab et
al., 2013). Con lo cual se puede decir
que la prevalencia de BLEE varía de
acuerdo a la localización geográfica y el
tiempo (Olukemi & Abba, 2012; Moniri
& Tavajjohi, 2011). Para MBL durante
los periodos de años 2003-2006; 2007-
2010; 2011-2014 se encontraron las
prevalencias de 22,3%, 23,1% y 21,3%,
respectivamente, además en los dos
últimos periodos fue el patrón fenotípico
con mayor prevalencia.
En otras partes del mundo como en
Asia, se encontró MBL con 28%,
74,5%, 70% (Arunagiri et al., 2012;
Bareja et al., 2011; Varaiya et al., 2008,
respectivamente). En África encontraron
MBL con 40%, 31%, 82% (Diab et al.
2013; Nagwa & Sherif, 2007; Rehab et
al., 2013, respectivamente).
Para este patrón fenotípico MBL se
observa en Sudamérica una prevalencia
casi similar a través del tiempo, pero
según los reportes registrados para
África y Asia se han reportado un mayor
incremento de la prevalencia de MBL a
través del tiempo (Vitkauskiene et al.,
2011). Esta diferencia podría deberse
por los pocos trabajos realizados y
encontrados para Sudamérica en el
último periodo 2011-2014. Para el
patrón fenotípico KPC se obtiene la
mayor prevalencia con el 15.8%, en el
último periodo 2011-2014, debido al
mayor uso de los carbapenemicos, sin
embargo su diseminación y detección
aun es escasa para Sudamérica.
Para la detección de los diversos
patrones fenotípicos de resistencia en P.
aeruginosa para Sudamérica se dio lo
siguiente: En la detección de BLEE el
método más usado fue por doble disco
difusión debido a que emplea los
mismos materiales y procedimientos que
un antibiograma de rutina, y a diferencia
del método disco combinado, no emplea
varios discos de susceptibilidad
adicionales; asimismo, no requiere
pruebas de tamizaje, implicando
menores costos de procesamiento,
además su sensibilidad es entre 98.2%-
100% y su especificidad, entre 96.9%-
100%, los cuales son mayores frente a
otros métodos (Lezameta, Gonzáles-
Escalante & Tamariz, 2010). Para la
detección de KPC solo se realizó por el
algoritmo KPC (SEDABEC, 2006). Para
la detección MBL en P. aeruginosa el
método más usado es doble disco
difusión esto puede ser a que se
encontraron trabajos donde señalan su
alta sensibilidad de 100 % y
especificidad que varía entre 96% a 100
% para este método (Khosravi, Tay &
Vadivelu, 2010; Pagniez et al., 2006).
CONCLUSIONES
En Sudamérica de los 21 trabajos
encontrados en los seis países de la
región, el país con mayor aporte de
estudios durante el análisis de los
diversos patrones fenotípicos de
resistencia AMPCd, BLEE, KPC, MBL
| Cátedra Villarreal | V. 4 | No. 1 | enero -junio | 2016 | 91
Carlos Bolaños, José Iannacone
en P. aeruginosa, fue Brasil con
28,6%, por lo contrario Perú fue el
país que menos estudios aportó al
análisis con 4,8%.
Argentina y Colombia fueron los
países donde se encontraron los
cuatro patrones fenotípicos de
resistencia AMPCd, BLEE, KPC,
MBL en P. aeruginosa.
Los patrones fenotípicos de P.
aeruginosa MBL y BLEE fueron los
de mayor prevalencia en encontradas
en el análisis de Sudamérica con un
21.9% y 18.5% respectivamente
De los tres periodos de años, fue en el
periodo 2007-2010 donde se
encontraron los patrones fenotípicos de
resistencia AMPCd, BLEE, KPC, MBL
de P. aeruginosa a nivel de Sudamérica
con una prevalencia de 3,4%, 14,1%,
12,6%, 23,1% respectivamente.
Para la detección del patrón fenotípico
de resistencia BLEE y MBL de P.
aeruginosa el método más usado fue el
doble disco difusión.
REFERENCIAS
Abarca, G. & Herrera, M. (2001).
Betalactamasas: su
importancia en la clínica y su
detección en el laboratorio.
Revista Médica del Hospital
Nacional Niños, 36, 77-104.
Aibinu, I., Nwanneka, T. & Odugbemi,
T. (2007). Ocurrence of ESBL and
MBL in clinical isolates of
Pseudomonas aeruginosa from
Lagos, Nigeria. Journal of
American Science, 3, 81-85.
Aránzazu, M. T., Coque, T. M. & Cantón,
R. (agosto, 2006). Pseudomonas
aeruginosa multirresistente
productora de PER-1 en España.
Enfermedades Infecciosas y
Microbiología Clínica, 24,
472-473.
Arunagiri, K., Sekar, B., Sangeetha,
G. & John, J. (2012). Detection
and characterization of metallo-
β-lactamases in Pseudomonas
aeruginosa by phenotypic and
molecular methods from clinical
samples in a tertiary care
Hospital. West Indian Medical
Journal, 61, 779-783.
Asboe, D., Gant, V., Aucken, H. M.,
Moore, D. A., Umasankar, S.,
Bingham, J. S., … Pitt, T. L.
(October, 1998). Persistence of
Pseudomonas aeruginosa strains
in respiratory infection in AIDS
patients. AIDS, 12, 1771-1775.
Bareja, R., Grover, P., Singh, V.,
Shinu, P., Sharma, M., Kumar,
A. & Arora, S. (2011). Rapid
detection of metallo-β-lactamase
in carbapenm resistant clinical
isolates of Pseudomonas
aeruginosa and Acinetobacter
species. Journal of Advance
Researches in Biological
Sciences, 3, 90-93.
Basak, S., Khode, M., Bose, S &
Mallick, S. (2009). Inducible
AmpC betalactamase producing
Pseudomonas aeruginosa isolated
in a rural hospital of central India.
Journal of Clinical and Diagnostic
Research, 3, 1921-1927.
Black, A., Moland, E. & Thomson,
K. (2005). AmpC disk test for
detection of plasmid mediated
AmpC beta-lactamases in
Enterobacteriaceae lacking
chromosomal AmpC beta-
lactamases. Journal of Clinical
Microbiology, 43, 3110-3113.
92 | Cátedra Villarreal | V. 4 | No. 1 | enero -junio | 2016 |
Patrones fenotípicos de resistencia en Pseudomonas aeruginosa de muestras clínicas a nivel de Sudamérica
Bouza, E., García, F., Cercenado, E.,
Marín, M., Díaz, M. & Sánchez.
F. (2003). Grupo Español para
el Estudio de Pseudomonas
aeruginosa: Estudio
multicéntrico en 136 hospitales
españoles. Revista Española
Quimioterapia, 16, 41-52.
Brooks, G. F., Carrol, K. C., Butel, J. S.,
Morse, S. A. & Mietzner, T. A.
(2005). Pseudomonas,
Acinetobacter y gram negativos
poco frecuentes. En, Microbiología
médica (18ª ed., pp. 285-291).
México: Manual Moderno.
Bush, K. & Jacoby, G. (2010). Updated
functional classification of beta-
lactamases. Antimicrobial Agents
and Chemotherapy, 54, 969-976.
Bush, K., Jacoby, G. & Medeiros,
A. (1995). A functional
classification scheme for beta-
lactamases and its correlation
with molecular structure.
Antimicrobial Agents and
Chemotherapy, 39, 1211-1233.
Bustamante, L. & Brevis, P. (2010).
Pesquisa de betalactamasas de
espectro extendido en cepas de
Pseudomonas aeruginosa
y klebsiella pneumoniae.
Recuperado de http://dspace.
utalca.cl/handle/1950/8343
Carmeli, Y., Troillet, N., Eliopoulos,
G. & Samore, M. (1999).
Emergence of antibiotic resistant
Pseudomonas aeruginosa:
Comparison of risk associated
with different antipseudomonal
agent. Antimicrobial Agents and
Chemotherapy, 43, 1379-1382.
Castanheira, M., Mendes, R., Walsh, T.,
Gales, A. & Jones, R. (June, 2004).
Emergence of the extended-
spectrum β-lactamase GES-1
in a Pseudomonas aeruginosa
strain from Brazil: Report from
the SENTRY Antimicrobial
Surveillance Program.
Antimicrobial Agents and
Chemotherapy, 48, 2344-2345.
Castillo, V., Ribas, A., Carranza, L. &
Aparicio, G. (2006). Cepas de
Pseudomonas aeruginosa de
origen hospitalario
multirresistentes a 21 antibióticos.
Bioquímica, 51, 41-48.
Cejas, D., Almuzara, M., Santella,
G., Tuduri, A., Palombarani, S.,
Figueroa, S., … Radice, M.
2008. Caracterización fenotípica
y genotípica de la resistencia a
imipenem en Pseudomonas
aeruginosa aisladas en un
Hospital de Buenos Aires.
Revista Argentina de
Microbiología, 40, 238-245.
Conejo, M., García, I., Martínez, L.,
Picabea, L. & Pascual, A. (2003).
Zinc eluted from siliconized latex
urinary catheters decreases Oprd
expression, causing carbapenem
resistance in Pseudomonas
aeruginosa. Antimicrobial Agents
Chemotherapy, 7, 2313-2315.
Crespo, M., Woodford, N., Sincalir,
A., Kaufmann, M. & Turon, J.
(2004). Outbreak of carbapenem
resistant Pseudomonas
aeruginosa producing VIM-8, a
novel metallo-β-lactamase in
tertiary care center in Cali,
Colombia. Journal Clinical
Microbiology, 42, 5094-5101.
Diab, M., Fam, N., El-Said, M., El-
Dabaa, E., El-Defrawy, I. &
Saber M. (2013). Occurrence of
VIM-2 Metallo-ß-lactamases in
imipenemresistantandsusceptible
| Cátedra Villarreal | V. 4 | No. 1 | enero -junio | 2016 | 93
Carlos Bolaños, José Iannacone
Pseudomonas aeruginosa clinical
isolates from Egypt. African
Journal of Microbiology
Research, 7, 4465-4472.
Díaz, J. (2008). Detección de
metalobetalactamasas (MBLs) en
Pseudomonas aeruginosa
resistentes a los carbapenems en un
Hospital Nacional, en los meses de
enero a octubre del año 2008 (Tesis
de maestría, Universidad Nacional
Mayor de San Marcos, Lima, Perú).
Recuperado de http://
cybertesis.unmsm.edu.pe/xmlui/
bitstream/handle/cybertesis/243/
Diaz_tj.pdf?sequence=1
Drawz, S. & Bonomo, R. (2010).
Three decades of beta-lactamase
inhibitors. Clinical Microbiology
Reviews, 23, 160-201.
Espinoza, P. (2010). Determinación de
metaloenzimas como mecanismos
de resistencia en aislamientos de
Pseudomonas sp. y Acinetobacter
sp. multirresistentes referidas al
laboratorio nacional de salud
(Tesis de licenciatura, Universidad
de San Carlos de Guatemala).
Recuperado de noviembre del
2012 desde: http://biblioteca.usac.
edu.gt/tesis/06/06_3018.pdf.
Farías, E., Medina, R., & Chavarría,
J. (2005). Neumonía
nosocomial por Pseudomonas
aeruginosa. Medicina Interna
de México, 21, 368-379.
Ferrero, S., Gómez, L. & Reparaz, M.
(2009). Resistencia a carbapenems
por metalobetalactamasas en
Pseudomonas aeruginosa.
Recuperado de http://www.unne.
edu.ar/unnevieja/investigacion/
com2009/CM-073.pdf.
Friedrich, M., Klauss-Dieter, L. &
Burke, C. (2008). Pseudomonas
aeruginosa Infections. Recuperado
de http://emedicine.medscape.
com/article/226748-overview
García, J., Rodríguez, E., Carpio, A.,
Salazar, E., Flores, F. &
Araque, Y. (2009).
Susceptibilidad antimicrobiana
de enterobacterias nosocomiales
productoras de betalactamasas
de espectro expandido. Revista
Kasmera, 37, 38-50.
Gaspareto, P., Martins, A., Zavascki, A.
& Barth, A. (2007). Occurrence of
blaspm-1 and blaimp-1 genes of
metallo-β-lactamases in clinical
isolates of Pseudomonas
aeruginosa from three universitary
hospitals in the city of Porto
Alegre, Brazil. Brazilian Journal
of Microbiology, 38, 108-109.
Gibb, A. P., Tribuddharat, C., Moore,
R., Louie, T., Krulicki, W.,
Livermore, D. M., … Woodford,
N. (January, 2002). Nosocomial
outbreaks of carbapenem-resistant
Pseudomonas aeruginosa with a
new blaIMP allele, blaIMP-7.
Antimicrobial Agents and
Chemotherapy, 46, 255-258.
Giwercman, B., Jensen, E. T., Høiby,
N., Kharazmi, A. & Costerton, J.
W. (May, 1991). Induction of β-
Lactamase production in
Pseudomonas aeruginosa biofilm.
Antimicrobial Agents and
Chemotherapy, 35, 1008-1010.
Gómez, C. A., Leal, A. L., Pérez de
Gonzales, M. J. & Navarrete, M.
L. (2005). Mecanismos de
resistencia en Pseudomonas
aeruginosa entendiendo a un
peligroso enemigo. Revista de la
Facultad de Medicina Universidad
Nacional Colombia, 53(1), 29-34.
94 | Cátedra Villarreal | V. 4 | No. 1 | enero -junio | 2016 |
Patrones fenotípicos de resistencia en Pseudomonas aeruginosa de muestras clínicas a nivel de Sudamérica
Gomes F. M. R., Caiaffa‐Filho, H.H.,
Burattini, M.N. & Rossi, F. (2010).
Metallo‐beta‐lactamases among
imipenem‐resistant Pseudomonas
aeruginosa in a brazilian
university hospital. Clinics (Sao
Paulo), 65, 825–829.
Horieh, S., Zohreh, K., Parviz, O.,
Mohamma, A. & Seyed, M. (2008).
Phenotypic detection of Metallo-
beta-lactamase producing
Pseudomonas aeruginosa
strains isolated from burned
patients. Iranian Journal of
Pathology, 3, 20-24.
Howard, D., Scott, I., Packard, R. &
Jones, D. (2003). The global
impact of drug resistance. Clinical
Infectious Diseases, 36, 4-10.
Jacoby, A. & Muñoz, P. (2005). The new
β-lactamases. New England Journal
of Medicine, 352, 380-391.
Jacoby, G. (2009). AmpC β-Lactamases.
Clinical Microbiology Reviews,
22, 161-182.
Kalantar, E., Taherzadeh, S., Ghadimi,
T., Soheili, F., Salimizand, H.
& Hedayatnejad, A. H. (2012).
Pseudomonas aeruginosa, an
emerging pathogen among burn
patients in Kurdistan province,
Iran. The Southeast Asian
Journal of Tropical Medicine
and Public Health, 43, 712-717.
Khosravi, Y., Tay, S. & Vadivelu, J.
(2010). First characterization of
blaVIM-11 cassette containing
integron in metallo-ß-lactamase
producing Pseudomonas
aeruginosa in Malaysia.
European Review for Medical
and Pharmacological
Sciences, 14, 999-1000.
Koneman, E., Allen, S., Janda, W.,
Schreckenberger, P., Winn, W.,
Procop, G. & Woods, G. (2008).
Diagnóstico microbiológico (6ª
ed.). Buenos Aires, Argentina:
Editorial Médica Panamericana.
Kong, K. F., Jayawardena, S. R.,
Indullkar, S. D., Del Puerto, A.,
Koh, C. L., Høiby, N. & Mathee,
K. (2005). Pseudomonas
aeruginosa AmpR is a global
transcriptional factor that regulates
expression of AmpC and PoxB β-
lactamases, proteases, quorum
sensing, and other virulence
factors. Antimicrobial Agents and
Chemotherapy, 49, 4567-4575.
Langaee, T. Y., Gagnon, L. & Huletsky,
A. (2000). Inactivation of the
ampD gene in Pseudomonas
aeruginosa leads to moderate-
basal-level and hyperinducible
AmpC β-lactamase expression.
Antimicrobial Agents and
Chemotherapy, 44, 583-589.
Lauretti, L., Riccio, M. L., Mazzariol,
A., Cornaglia, G., Amicosante,
G., Fontana, R. & Rossolini, G.
M. (1999). Cloning and
characterization of blaVim, a
new integron-borne metallo-
b-lactamase genefroma
Pseudomonas aeruginosa clinical
isolate. Antimicrobial Agents and
Chemotherapy, 43, 1584-1590.
Lezameta,
L.,
Gonzáles-Escalante,
E. &
Tamariz,
J.
H.
(2010).
Comparación de cuatro métodos
fenotípicos
para
la
detección
de beta-lactamasas de espectro
extendido.
Revista
Peruana
Medicina Experimental
y Salud
Pública, 27, 345-351.
Livermore,
D.
(2002).
Multiple
mechanisms
of
antimicrobial
| Cátedra Villarreal | V. 4 | No. 1 | enero -junio | 2016 | 95
Carlos Bolaños, José Iannacone
resistance in P. aeruginosa: our
worst nightmare? Clinical
Infectious Diseases, 34, 634-640.
Lösch, L., Merino, L. A. & Alonso, J.
M. (2005). Resistencia
antimicrobiana en cepas de
Pseudomonas aeruginosa aisladas
de fuentes de agua de la provincia
del Chaco (Argentina) [Resumen].
Recuperado de http://www.
unne.edu.ar/unnevieja/Web/cyt/
com2005/3-Medicina/M-014.pdf
Machain, M., Suárez, J., Ferreiro, D. &
Ceregido E. (2006). Detección de ß
-lactamasas de espectro extendido
(BLEE) en Pseudomonas
aeruginosa (PAE) en un hospital
de agudos [Resumen]. Presentado
en el Congreso SADEBAC
Asociación Argentina de
Microbiología.
Magalhães, V., Lins, A. & Magalhães,
M. (2005). Metallo-β-lactamase
producing Pseudomonas
aeruginosa strains isolated in
hospital in Recife, Brazil.
Brazilian Journal of
Microbiology, 36, 123-125.
Mandell, R., Gordon, D., Balbachan, E.
& Bennet, J. (2002). Enfermedades
infecciosas: Principios y Prácticas
(5ª ed.) Buenos Aires, Argentina:
Panamericana.
Marchán, O. (2012). Transferencia de
resistencia a betalactámicos en
aislados clínicos de Pseudomonas
aeruginosa (Tesis de licenciatura,
Universidad de Oriente Núcleo de
Sucre, Venezuela). Recuperado
de http://ri.bib.udo.edu.ve/
handle/123456789/2410
Marchand, P. (2002). Microorganismos
indicadores de la calidad del agua
de Lima metropolitana (Tesis
de licenciatura, Universidad
Nacional Mayor de San Marcos,
Lima, Perú). Recuperado de http://
sisbib.unmsm.edu.pe/bibvirtual/
tesis/basic/marchand _ p _ e/
Marchand_P_E.htm
Marra, A., Pereira, C., Gales, A.,
Menezez, L., Cal, R. G., de Souza,
J. M., ... Wey, S. B. (2006).
Bloodstream Infections with
Metallo-β-Lactamase producing
Pseudomonas aeruginosa:
Epidemiology, Microbiology,
and Clinical Outcomes.
Antimicrobial Agents and
Chemotherapy, 50, 388-390.
Martínez, P., Mercado, M. &
Máttar, S. (2003).
Determinación de β-lactamasas
de espectro
extendido en gérmenes
nosocomiales del Hospital San
Jerónimo, Montería, Colombia.
Colombia Médica, 34, 196-205.
Moniri, R. & Tavajjohi, Z. (2011).
Detection of ESBLs and MDR
in Pseudomonas aeruginosa in
a tertiary-care teaching hospital.
Iranian Journal of Clinical
Infectious Diseases, 6, 18-23.
Morales, G., Baleta, B., Camargo, S. &
Correa, M. (2008). Determinación
de β- lactmasas en Pseudomonas
aeruginosa en un Hospital público
de la ciudad de Valledupar.
Revista Colombiana de Medicina
Tropical, 2, 49-55.
Nagwa, G. & Sherif, A. (2007).
Genetic diversity of metallo-
betalactamases produced
by carbapenem resistant
Pseudomonas aeruginosa.
Egyptian Journal of Medical
Microbiology, 16, 691-697.
Navarro, F., Calvo, J., Cantón, R.,
96 | Cátedra Villarreal | V. 4 | No. 1 | enero -junio | 2016 |
Patrones fenotípicos de resistencia en Pseudomonas aeruginosa de muestras clínicas a nivel de Sudamérica
Fernández, F. & Mirelis, B.
(2011). Detección fenotípica de
mecanismos de resistencia en
gramnegativos. En R. Cantón & E.
Cercenado (Eds.), Procedimientos
en microbiología clínica.
Recomendaciones de la Sociedad
Española de Enfermedades
Infecciosas y Microbiología clínica
(2ª ed.). Recuperado de http://
www.seimc.org/documentos/
protocolos/microbiología/.
Nordmann, P., Cuzon, G. & Naas,
T. (2009). The real threat of K.
pneumonia carbapenemase-
producing bacteria. Lancet
Infectious Disease, 9, 228-236.
Núñez,
L.
2009.
Epidemiologia
molecular
de
Pseudomonas
aeruginosa
productoras
de
metalobetalactamasas
(Tesis
de
maestría,
Universidad del
Zulia,
Venezuela). Recuperado
de
http://tesis.luz.edu.ve/
tde_busca/processaPesquisa.
php?pesqExecutada=1&id=2219
Ochoa, S., López-Montiel, F.,
Escalona, G., Cruz-Córdova, A.,
Dávila, L., López-Martínez, B., ...
Xicohtencatl-Cortes, J. (2013).
Pathogenic characteristics of
Pseudomonas aeruginosa strains
resistant to carbapenems associated
with biofilm formation. Boletin
Médico del Hospital Infantil de
México, 70, 136-150.
Olukemi, A. & Alaba, A. (2012).
Ocurrence of extended spectrum
betalactamase producing
Pseudomonas aeruginosa
strains in south-west Nigeria.
Research Journal of Medical
Sciences, 6, 93-96.
Pagani, L., Mantengoli, E., Migliavacca,
R., Nucleo, E., Pollini, S., Spalla,
M, … Rossolini, G. M. (2004).
Multifocal detection of
multidrug-resistant P. aeruginosa
producing the PER-1 extended-
spectrum β-lactamase in
Northern Italy. Journal Clinical
of Microbiology, 42, 2523-2529.
Pagniez, G., Radice, M., Cuirolo, A.,
Rodríguez, O., Rodriguez, H.,
Vay, C., … Gutkind, G. (2006).
Prevalencia de metalo-β-
lactamasas en P. aeruginosa
resistentes a carbapenemes en un
Hospital Universitario de Buenos
Aires. Revista Argentina de
Microbiología, 38, 33-37.
Pasteran, F., Faccone, D., Gomez, S.,
De Bunder, S., Spinelli, F.,
Rapoport, M., … Corso, A.
(May, 2012). Detection of an
international multiresistant clone
belonging to sequence type 654
involved in the dissemination of
KPC-producing Pseudomonas
aeruginosa in Argentina. Journal
of Antimicrobial Chemotherapy,
67, 1291-1293.
Pasteran, F., Guerreiro, L., Goris, V.,
Sujemeckis, A., Faccone, D. &
Campos, K. (2004). β-lactamasa
de espectro extendido (BLEE)
GES-1 en aislamientos clínicos de
Pseudomonas aeruginosa de
Argentina: Evaluación de métodos
fenotípicos para su detección
[Resumen]. Presentado en el XVII
Congreso Latinoamericano de
Microbiología. X Congreso
Argentino de Microbiología.
Asociación Argentina de
Microbiología.
Pasteran, F., Veliz, O., Faccone, D.,
Guerriero, L., Rapport, M.,
Mendez, T. & Corso, A. (2011).
A simple test for detection of
| Cátedra Villarreal | V. 4 | No. 1 | enero -junio | 2016 | 97
Carlos Bolaños, José Iannacone
KPC and metallo-β-lactamase c ar
b ap e n e m a s e - pro du c i ng
Pseudomonas aeruginosa isolates
with the use of meropenem
disks supplemented with
aminophenylboronic acid
dipicolinic acid and cloxacilin.
Clinical Microbiology
Infection, 17, 1438-1441.
Paterson, D. L. & Bonomo, R. A.
(2005). Extended-Spectrum β-
Lactamases: A Clinical
Update. Clinical Microbiology
Reviews, 18, 657-686.
Pellegrino, F., Netto-dos Santos, K.,
Riley, L. & Moreira, B. (2006).
BlaGES carrying Pseudomonas
aeruginosa isolates from a public
hospital in Rio de Janeiro, Brazil.
Brazilian Journal of Infectious
Diseases, 10(4), 251-253.
Pérez, A., García, P., Poggi, H., Braun,
S., Castillo, C., Román, J., …
González, G. (2008). Presencia de
metalo-ß-lactamasas en
Pseudomonas aeruginosa
resistente a imipenem. Revista
Médica de Chile, 136, 423-432.
Perozo, A. J., Castellano, M. J.,
Ling, E. & Arraiz, N. (julio,
2012). Detección fenotípica de
metalobetalactamasas en
aislados clínicos de
Pseudomonas aeruginosa.
Revista Kasmera, 40, 113-121.
Piersigilli, A., Enrico, M., Bongiovanni,
M., Bilbao, L., Martínez, G &
Ledesma, E. (2009). Aislados
clínicos de Pseudomonas
aeruginosa productores de
β-lactamasas de espectro
extendido en un centro privado
de Córdoba. Revista chilena de
infectología, 26, 331-335.
Pitout, J. & Laupland, K. (2008).
Extended-spectrum beta-
lactamase producing
Enterobacteriaceae: an emerging
public health concern. Lancet
Infectious diseases, 8, 159-166.
Queenan, A. & Bush, K. (2007).
Carbapenemases: The versatile
β-lactamases. Clinical
Microbiology Reviews, 20,
440-458.
Rahme, L., Lee, S., Wong, R., Tompkins,
S., Calderwood, F. & Ausubel, M.
(1997). Use of model plant hosts to
identify Pseudomonas aeruginosa
virulence factors. The Proceedings
of the National Academy of
Sciences, 94, 13245-13250.
Rehab, A., Nehal, H & Gamal, F. (2013).
Prevalence of extended spectrum
betalactamase, ampc betalactamase
and metallo-β-lactamase among
clinical isolates of Pseudomonas
aeruginosa. Journal of Advanced
Biotechnology and Bioengineering,
1, 22-29.
Restrepo, A., Robledo, J., Leiderman, E.
& Botero, D. (2003).
Enfermedades Infecciosas (6ª ed.).
Medellín, Colombia: Corporación
para Investigaciones Biológicas.
Rodríguez, M. J. M., Poirel, L. &
Nordmann, P. (2009). Molecular
epidemiology and mechanisms of
carbapenem resistance in
Pseudomonas aeruginosa.
Antimicrobial Agents and
Chemotherapy, 53, 4783-4788.
Rotstein, C., Evans, G., Born, A.,
Grossman, R., Light, R. B.,
Magder, S., … Zhanel, G. (2008).
Clinical practice guidelines for
hospital - Acquired Pneumonia
and ventilator associated
98 | Cátedra Villarreal | V. 4 | No. 1 | enero -junio | 2016 |
Patrones fenotípicos de resistencia en Pseudomonas aeruginosa de muestras clínicas a nivel de Sudamérica
pneumonia in adults. Canada
Journal of Infectious Disease and
Medical Microbiology, 19, 19-53.
Saavedra, S., Duarte, C., González,
M. & Realpe, M. (2014).
Caracterización de
aislamientos de Pseudomonas
aeruginosa productores de
carbapenemasas de siete
departamentos de Colombia.
Revista Biomédica, 34, 217-
223.
Saeide, S., Alavi-Naini, R. & Shayan,
S. (2014). Antimicrobial
Susceptibility and Distribution of
TEM and CTX-M genes among
ESBL-producing Klebsiella
pneumoniae and Pseudomonas
aeruginosa causing urinary
tract infections. Zahedan
Journal of Research in
Medical Sciences, 16, 1-5.
Sánchez, A., Salso, S., Culebras, E.
& Picazo, J. J. (2004).
Resistencia a carbapenemes por
metaloenzimas en aislamientos
clínicos de Pseudomonas
aeruginosa. Revista española de
quimiotererapia, 17, 336-340.
Sanders, C. & Sanders, W. (June,
1979). Emergence of
resistance
to cefamandole: possible role
of cefoxitin inducible
betalactamases. Antimicrobial
Agents and Chemotherapy, 15,
792-797.
Scheffer, M., Bazzo, M., Steindel,
M., Darini, A., Clímaco, E. &
Dalla, L. (2010). Intrahospital
spread of carbapenem-resistant
Pseudomonas aeruginosa in a
University Hospital in
Florianópolis, Santa Catarina,
Brazil. Revista da Sociedad de
Brasileira de Medicina
Tropical, 43, 367-371.
Soberón, G. (2003). Pseudomonas
aeruginosa. En Martínez, E. &
Martínez, J. C. (Eds.), Microbios.
Recuperado de http://www.
biblioweb.tic.unam.mx/libros/
microbios/index.html
Stuart, B. & Levy, M. (1998).
Multidrug Resistance-A sing of
the times. New England Journal
Medical, 7, 1376-1377.
Subcomisión de antimicrobianos de la
sociedad argentina, bacteriología,
micológica y parasitología clínica
(2006). Caracterización fenotípica
de la resistencia a los β-lactámicos
en Pseudomonas aeruginosa y
Acinetobacter sp. Recuperado
de http://www.aam.org.ar/
novedades/Consen- so%20
BNNF%20Anexo.pdf.
Thomson, K. (2010). Extended-
spectrum betalactamase, amp,
and carbapenemase issues.
Journal of Clinical
Microbiology, 48, 1019-1025.
Torres, A., Aznar, R., Gatell, J., Jiménez,
P., Gonzáles, J., Ferrer, A., …
Rodríguez-Roisin, R. (1990).
Incidence, risk, and prognosis
factors of nosocomial pneumonia in
mechanically ventilated patients.
The American Review of
Respiratory Disease, 142, 532-528.
Tovar, J. (2008). Suceptibilidad
antimicrobiana y detección de
genes de resistencia para la
producción de betalactamasas, en
cepas de Pseudomonas aeruginosa
aisladas d muestras clínicas (Tesis
de licenciatura, Universidad de
Oriente Núcleo de Sucre,
Venezuela). Recuperado
de http://ri.bib.udo.edu.ve/
handle/123456789/4035
| Cátedra Villarreal | V. 4 | No. 1 | enero -junio | 2016 | 99
Carlos Bolaños, José Iannacone
Vahdani, M., Azimi, L., Asghari, B.,
Bazmi, F. & Rastegar, L. (2012).
Phenotypic screening of extended
spectrum ß-lactamase and
metallo ß-lactamase in multidrug
resistant Pseudomonas aeruginosa
from infected burns. Annals of
Burns and Fire Disasters, 25, 78-
81.
Varaiya, A., Kulkarni, N., Kulkarni,
M., Bhalekar, P., & Dogra, J.
(2008). Incidence of metallo
beta lactamase producing
Pseudomonas aeruginosa in ICU
patients. The Indian Journal
Medical Research, 4, 398-402.
Vidal, F., Mensa, J., Almela, M.,
Olona, M. & Martínez, J. (2003).
Bacteraemia in adults due to
glucose non-fermentative gram
negative bacilli other than
Pseudomonas aeruginosa. Oxford
Journal of Medicine, 96, 227-234.
Vitkauskienė,
A.,
Skrodenienė,
E., Dambrauskienė, A., Bakšytė,
G.,
Macas,
A
& Sakalauskas,
R.
(2011).
Characteristics
of
Carbapenem-Resistant
Pseudomonas
aeruginosa Strains
in Patients with Ventilator-
Associated
Pneumonia
in
Intensive Care
Units. Medicina
(Kaunas), 47, 652-656
Wang, Ch., Cai, P., Chang, D.
& Zuhuang, M. (2006). A
Pseudomonas aeruginosa
isolate producing the GES-5
extended-spectrum β-lactamase.
Journal Antimicrobial and
Chemotherapy, 57, 1261-1262.
100 | Cátedra Villarreal | V. 4 | No. 1 | enero -junio | 2016 |
