Toxicidad de Chenopodium ambrosioides (Amaran-
thaceae) e Imidacloprid sobre Cryptolaemus mon-
trouzieri (Coleoptera:Coccinellidae)
Toxicity of Chenopodium ambrosioides (Amaranthaceae) and Imidaclo-
prid on Cryptolaemus montrouzieri (Coleoptera:Coccinelidae)
Recibido: marzo 12 de 2014 | Revisado: abril 16 de 2014 |
Aceptado: mayo 22 de 2014
Víctor Santiago*
Emilio Bonifaz**
Alfonzo Alegre*** José
Iannacone1,2,****
* victor.sanhe@gmail.com
** emilio.bio92@gmail.com
*** alej_shirio@hotmail.com
**** joseiannacone@gmail.com
1 Laboratorio de Invertebrados Facultad de
Ciencias Biológicas
Universidad Ricardo Palma
2 Laboratorio de Ecofisiología Animal (LEFA) Facultad de
Ciencias Naturales y Matemática Universidad Nacional
Federico Villarreal
Ab s t r act
Synthetic insecticides can affect those who use it may be teratogenic,
mutagenic or carcinogenic, which is why seeking alternatives to control
pests that are readily available, low cost and biodegradable as extracts
from plants. In this paper the effect of aqueous extract of Chenopo-
dium ambrosioides L. (Amaranthaceae) and neonicotinoid insecticide
imidacloprid with five concentrations on adult coccinellid Cryptolae-
mus montrouzieri, using bottled water as a control. It was found that the
aqueous extract of C. ambrosioides showed no insecticidal effect on
adults of C. montrouzieri at 24h and 120h exposure, showing effect
just after 144 h of exposure an LC50 of 1.4 x 103 mg•L-1, in
contrast the imidacloprid presented to 24 h LC50 of 43.38 mg•L-
1. Our results show that the extract of C. ambrosioides could be
compatible with C. montrouzieri in integrated pest management.
Keywords: chenopodium ambrosioides, Cryptolaemus
montrouzieri, imidacloprid, toxicity
Re s u m e n
Los insecticidas sintéticos pueden afectar a quienes los usan, pues pue-den
ser teratogénicos, mutagénicos o carcinogénicos, es por esto que se busca
alternativas para el control de plagas que sean de fácil obten-ción, bajo
costo y sean biodegradables como los extractos provenientes de las plantas.
En el presente trabajo se evaluó el efecto del extracto acuoso de
Chenopodium ambrosioides L. (Amaranthaceae) y del in-secticida
neonicotinoide imidacloprid en cinco concentraciones sobre adultos del
coccinélido Cryptolaemus montrouzieri, utilizándose agua embotellada
como control. Se encontró que el extracto acuoso de C. ambrosioides no
presentó efecto insecticida sobre adultos de C. mon-trouzieri a las 24h y
120h de exposición, mostrando recién efecto a las 144 h de exposición con
una CL50 de 1,4 x 103 mg.L-1 , en cambio el Imidacloprid presentó a las
24 h una CL50 de 43,38 mg.L-1. Nuestros resultados señalan que podría ser
compatible el uso del extracto de C. ambrosioides junto con C.
montrouzieri en el manejo integral de plagas.
Palabras claves: chenopodium ambrosioides, Cryptolaemus
mon-trouzieri, imidacloprid, toxicidad
| Cátedra Villarreal | Lima, perú | V. 2 | N. 1 | 19 - 27 | enero -junio | 2014 | issn 2310-4767 19
Víctor Santiago, Emilio Bonifaz, Alfonzo Alegre, José Iannacone
Introducción
Los insecticidas sintéticos causan efectos
secundarios como el desequilibrio ambien-tal,
resistencias, problemas en salud huma-na y
surgimiento de plagas más agresivas (Food
and Agriculture Organization FAO, 1999;
Iannacone et al., 2007); además de ser
responsables de la perdida de depredado-res
naturales y polinizadores (Freemark y Boutin,
1995). Es por estos problemas que se busca
alternativas para el control que pue-dan ser
usadas en el manejo integral de plagas
(Bunch, 1997). Es ahí donde los extractos de
plantas han cobrado importancia al poseer
metabolitos secundarios que pueden actuar
como biocontroladores (Celis et al., 2008).
Chenopodium ambrosioides L. (Amaran-
thaceae) también llamada “paico” en el Perú, es
una hierba perenne cuyas hojas, raíces e inflo-
rescencias se han usado a lo largo de la historia
de pueblos nativos de América Latina y el Ca-
ribe como planta medicinal o para sazonar ali-
mentos (Nascimento et al. 2006; Mostacero et
al., 2011). Así mismo, su aceite esencial ha sido
usado para tratar parasitismo por helmintos en
humanos y otros animales (Quinlan et al., 2002).
Entre sus propiedades, también cuen-ta con
actividad insecticida y puede ser usado como
alternativa a insecticidas químicos que puedan
mermar el uso de controladores bioló-gicos con
el fin de lograr un manejo integral de plagas
(Rumpf, Frampton & Dietrich, 1998).
El imidacloprid es uno de los primeros
insecticidas neonicotinoides que actúa como
una neurotoxina en los receptores postsinápti-
cos de acetilcolina y que es usado en el control
de insectos chupadores, incluyendo áfidos,
queresas, mosca blanca o masticadores como
Coleóptera y Lepidóptera, gracias a que es ab-
sorbido rápidamente por la planta. Este insec-
ticida ha demostrado toxicidad contra contro-
ladores biológicos (Ware y Whitacre, 2004).
Entre los controladores utilizados en el
Programa Nacional de Control Biológico,
Servicio Nacional de Sanidad Agraria (PN-CB-
SENASA) está el Cryptolaemus mon-trouzieri
Mulsant, 1850. Este coccinélido es utilizado
para el control de especies de la fa-milia
Pseudococcidae, en especial el Planococ-cus
citri (Risso, 1913) en cultivos de cítricos,
aunque también ha sido utilizado para con-trolar
cochinillas de la familia Diaspididae con menos
efectividad (Katsoyannos, 1996; Iannacone y
Perla, 2011). También C. mon-trouzieri se
alimenta de mosca blanca, áfidos, queresas y
ácaros (Aghabaglou et al., 2013).
Es por esto que es necesario evaluar el
riesgo que puedan ocasionar estos dos in-
secticidas sobre los controladores bioló-
gicos afectando su desarrollo y prolifera-
ción, lo que resulta perjudicial a la hora de
aplicar un MIP (Manejo Integrado de
Plagas) (Stapel, Cortesero & Lewis, 2000).
El objetivo de esta investigación fue
evaluar el efecto tóxico de C. ambrosioi-
des e Imidacloprid, sobre C. montrouzieri.
Método
Diseño experimental
Para las pruebas de toxicidad con C. mon-
trouzieri con el extracto acuoso de C. ambro-
sioides, se usaron cinco concentraciones (20%,
10%, 5%, 2,5% y 1,25%), cada una con cuatro
repeticiones y un control negativo a base de
agua embotellada marca Cielo®. Por otro lado,
se evaluó el efecto toxico del imidacloprid 35%
(Nombre comercial DK-PRID) adquirido en
Drokasa® sobre C. montrouzieri con cinco
concentraciones (350; 175; 87,5; 43,75; 21,875
mg•L-1) a partir de la dosis sugerida para el
control de plagas señalada en la etiqueta del
producto (1 mL•L-1 o 350 mg•L-1)
(Iannaco-ne et al., 2011).
Materiales
Sustancia química: El imidacloprid es insec-
ticida sistémico, N-[1-[(6-Chloro-3-pyridyl)
methyl]-4,5-dihydroimidazol-2-yl] nitrami-
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Toxicidad de Chenopodium ambrosioides (Amaranthaceae) e Imidacloprid sobre Cryptolaemus montrouzieri (Coleoptera:-Coccinellidae)
da, C9H10ClN5O2 (PM= 255,661 g •mol-1;
CAS = 13826-41-3). Su solubilidad en agua es
de 0,51 g/L a 200 °C. Imidacloprid está cata-
logado como “moderadamente tóxico” por la
Organización Mundial de la Salud (OMS) y la
Agencia de Protección del Medio Ambien-te de
Estados Unidos (USEPA) (clase II o III,
requiriendo una etiqueta de “Peligro” o “Pre-
caución”), y con potencialidad de ser contami-
nante de aguas subterráneas. Es un “probable”
carcinógeno por la EPA (grupo E), y no está en
la lista de tóxicos para el sistema endocrino,
reproductivo o de desarrollo.
Material biológico: Se adquirió la planta de C.
ambrosioides en el Mercado de Magdalena del
Mar, Lima, Perú. Se identificó con una clave
dicotómica (Rivas, 2007) en el Laboratorio de
Botánica de la Universidad Ricardo Palma. Los
coccinélidos adultos de C. montrouzieri (Ver
Figura 1), fueron adquiridos en el PN-CB-
SENASA y fueron identificados con claves
dicotómicas de Gordon (1978, 1985) y Xiong-
Fei y Gordon (1986).
Bioensayos: Para los ensayos de toxicidad se
utilizó el extracto acuoso de hojas de C. am-
brosioides. Las hojas se secaron en una estu-fa a
45 °C por 48 h, y posteriormente fueron molidas
y cernidas para luego tomar 60 g de la molienda
obtenida y se maceró con 300 mL de agua
mineral embotellada Cielo® durante 48 h en un
frasco de vidrio color ámbar de capaci-dad de
1000 mL. Transcurrido este tiempo, se filtró el
extracto acuoso con papel Whatman N°2 para
luego ser homogenizado. A par-tir de este
extracto de concentración inicial 20% (p/v), se
realizaron diluciones seriadas con agua
embotellada en base a un factor de dilución de
0,5. Por otro lado, para los trata-mientos con
imidacloprid 35% se prepararon 80 diluciones
dobles seriadas obteniéndose las concentraciones
de 21,88; 43,75; 87,5; 175 y 350 mg•L-1.
Todos los ensayos se realizaron en un
ambiente controlado a 22ºC±2.
Toxicidad por inmersión: Los adultos de C.
montrouzieri se sometieron por 10 s a las dilu-
ciones de C. ambrosioides e imidacloprid.
Para el control se utilizó agua embotellada
(Ianna-cone, Alvariño y Paredes, 2009). Se
utilizaron 10 individuos por cada repetición.
Después de realizar la inmersión se les
colocó en envases de 100 mL y luego se
realizó el conteo de in-dividuos vivos a 24
h, 120 h y 144 h de expo-sición.
Procedimiento
Análisis estadístico: Para calcular la correc-
ción de la mortalidad se utilizó la fórmula de
Henderson-Tilton obtenida en el programa LdP
Line (Bakr, 2007). Para el cálculo de la CL50 se
utilizó el procedimiento estadístico Probit,
elaborando una gráfica donde las abs-cisas son
el logaritmo en base diez de la con-centración
de los tratamientos y los valores Probit de las
mortalidades en las ordenadas. Estos valores
Probit fueron obtenidos con una tabla de
transformación. Luego de obtener la línea de
regresión, se calculó en base a la ecua-ción de la
recta la CL50 (Concentración letal media). Se
calcularon igualmente los valores de LOEC
(Concentración más baja de efec-tos
observables) y NOEC (Concentración de efectos
no observables) para ambos biocidas. Todo este
procedimiento se realizó en el pro-grama Excel
2010. Los estadísticos descripti-vos fueron
calculados con el programa esta-dístico IBM
SPSS Statistics 22.0 versión 20. Se realizó el
análisis de varianza (ANDEVA) y la prueba
post hoc de Tukey HSD con un nivel de
significancia de p≤0,05.
Resultados
El extracto acuoso de C. ambrosioides no
presentó efecto insecticida sobre adultos de C.
montrouzieri a las 24 h de exposición del
extracto, pues sus resultados no difirieron sig-
nificativamente del control (p>0,05). A 120 h
de exposición se observó un aumento gradual
de la toxicidad, y a las 144 h de exposición se
observó un aumento drástico de la mortali-dad
con respecto al control (p≤0,05) (Tabla 1).
También se determinaron los valores de
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Víctor Santiago, Emilio Bonifaz, Alfonzo Alegre, José Iannacone
NOEC y LOEC para ambos biocidas, resultando mayores los valores para el extracto acuoso de C.
ambrosioides respecto al imidacloprid.
Tabla 1
Toxicidad del extracto acuoso de Chenopodium ambrosioides y de imidacloprid sobre
adultos de Cryptolaemus montrouzieri (Coleoptera: Coccinellidae).
Letras minúsculas iguales en una misma columna representan que no hay diferencia significativa entre los
valores por la prueba de Tukey (p≤0,05). *Datos insuficientes para el cálculo de CL50.
El imidacloprid presentó sobre los adultos de
C. montrouzieri a las 24 h de exposición, di-
ferencias significativas entre el control y las
concentraciones desde 43,75 mg.L-1 (p≤0,05)
(Tabla 1). A las 120 h y 144 h se observaron
diferencias entre el control y todas las concen-
traciones. Las concentraciones de 175 y 350
mg.L-1 obtuvieron mortalidades de 100% en
todas las repeticiones desde la primera eva-
luación a 24 h de realizado el bioensayo
(Tabla 1). Los valores de CL50 presentaron
valores de mayor a menor toxicidad entre las
24 h hasta las 144 h de exposición.
El imidacloprid sobre C. montrouzieri a 144 h
de exposición fue 267 y 572 veces más tóxico
que el extracto acuoso de C. ambrosioides en
términos de CL50 y LOEC, respectivamente.
Discusión
El análisis fitoquímico de las hojas de C. am-
brosioides procedente de Camerún muestra
que esta planta presenta 96% de aceites esen-
ciales: α-terpineno (37,6%), p-cymeno (50%),
cis-α-farneseno (1,4%), ascaridol (3,5%), car-
vacrol (3,3%) entre otros (Tapondjou et al.,
2002). La composición de estos aceites esen-
ciales puede variar según la procedencia de la
planta. El principio activo con mayor poder
insecticida contra larvas de Sitophilus zeamais
(Motschulsky, 1855) (Curculionidae) es el as-
caridol (Chu, Hu & Liu, 2010). Así mismo, la
fracción que contiene Z-ascaridol (44,4%), E-
ascaridol (30,2%) y p-cymeno (25,4%)
presentaron actividad fungicida contra As-
pergillus flavus (Link, 1809) Aspergillus niger
(Tieghem, 1867), Aspergillus glaucus (Raper
& Fennell, 1965), Aspergillus ochraceous (Wil-
helm, 1877) y Colletotrichum gloeosporioides
(Penz. & Sacc, 1884) (Jardim, Jham, Dhingra
& Freire, 2008). Entre otros efectos, el C. am-
brosioides ha logrado tener un efecto insectici-
da sobre dípteros como Aedes aegypti (Linneo,
1762) (Leyva et al., 2009) o coleópteros como
Callosobruchus maculatus (Fabricius, 1775)
(Bruchidae) (Sanabria y Ramírez, 2013). En
otros trabajos, el extracto acuoso de C. ambro-
sioides no presentó actividad insecticida cinco
días después de la aplicación sobre Rhyzoper-
tha dominica (Fabricius, 1792) (Coleoptera:
Bostrichidae) (Guzzo, Tavares & Vendramin,
2006). El extracto acuoso de C. ambrosioides
presenta una CL50 mucho mayor que las do-
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Toxicidad de Chenopodium ambrosioides (Amaranthaceae) e Imidacloprid sobre Cryptolaemus montrouzieri (Coleoptera:-Coccinellidae)
sis utilizadas y actúa sobre C. montrouzieri a las
144 h de exposición, siendo su principio activo
el ascaridol (Castellanos, 2008). En nuestros
resultados, se ha demostrado que el extracto
acuoso de C. ambrosioides desde 1,25x104 a 2
x105mg•L-1 de concentración no representa
un riesgo para el coccinélido C. montrouzieri
hasta las 120 h de exposición, pero sí hay efecto
significativo de mortalidad
a las 144 h de exposición, y se puede emplear
en el Manejo Integral de Plagas (MIP).
Los insecticidas neonicotenoides como el
imidacloprid pueden ocasionar efectos letales
y subletales sobre artrópodos benéficos como
controladores naturales no objetivos del con-
trol (Smith & Krischik, 1999; Khani, Ahmadi
& Ghadamyari, 2012). Se ha observado efectos
sobre depredadores como en la sobrevivencia de
adultos de Chrysoperla carnea (Stephens, 1836)
(Rogers, Krischik & Martin, 2007) y so-bre
Orius insidiosus (Say, 1832) (Funderburk,
Srivastava, Funderbuck & McManus, 2013). Se
ha determinados los efectos toxicológicos del
imidacloprid en parasitoides como Eret-mocerus
mundus (Mercet, 1931) (Sohrabi, Shishehbor,
Saber & Mosaddegh, 2014), Ha-brobracon
hebetor Say, 1857 (Sarmadi, Nou-ri-Ganbalani,
Rafiee-Dastjerdi, Hassanpour
& Farshbaf-Pourabad, 2010; Rafiee-Dastjerdi
et al., 2012) y Microplitis croceipes (Cresson,
1872) (Stapel, Cortesero & Lewis, 2000). De
igual forma se han visto efectos deletéreos del
imidacloprid sobre hongos antagonistas como
Trichoderma harzianum (Rifai, 1969; Sivpar-
sad, Chiuraise,Laing & Morris, 2014).
En el manejo integral de plagas los coc-
cinélidos han demostrado ser depredadores
eficientes. Los insecticidas puede ocasionar
efectos directos o indirectos y afectar a las
poblaciones de los coccinélidos (Iannacone y
Perla, 2011; Khani et al., 2012; Alvandy, Agha-
baglou, Goldasteh & Karahroudi, 2013).
Se ha evaluado el efecto del imidacloprid
en coccinélidos depredadores como Coleome-
gilla maculata De Geer, 1775 (Smith & Kris-
chik, 1999), Harmonya axyridis (Pallas, 1772)
(Vincent, Ferran, Guige, Gambier & Brun,
2000) y Serangium japonicum Chapin, 1940
(He, Zhao, Zheng, Desneux & Wu, 2012). En
este trabajo se observó toxicidad del imidaclo-
prid sobre C. montrouzieri desde una concen-
tración mucho menor (21,875 mg•L-1) a
la de su CL50 a 144 h de exposición. El
Imida-cloprid ha demostrado que tiene efecto
tóxico sobre huevos de C. montrouzieri
(Khani et al., 2012; Alvandy et al., 2013;
Aghabaglou, Al-vandy, Goldasteh & Rafiei,
2013). Este insecti-cida afecta el ciclo de vida
del C. montrouzieri, reduciendo su
longevidad, fecundidad y otros parámetros
reproductivos (Alvandy et al., 2013).
Finalmente, se recomienda realizar prue-
bas en campo para verificar el impacto de los
extractos de C. ambrosioides y del insecticida
imidacloprid sobre C. montrouzieri, con el fin
de obtener información sobre su efectividad
insecticida y su compatibilidad con controla-
dores biológicos naturales.
Figura 1. Ejemplar adulto del
Cryptolaemus montrouzieri
| Cátedra Villarreal | V. 2 | No. 1 | enero -junio | 2014 | 23
Víctor Santiago, Emilio Bonifaz, Alfonzo Alegre, José Iannacone
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